最新刊期
2011 年 第 30 卷 2 期
- 摘要：采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白,建立了人角质形成细胞HaCaT受2,4-二硝基苯磺酸(DNBS)刺激前后的双向胶内差异凝胶电泳(2D-DIGE)图谱,每组平行样本数为3。凝胶采用蛋白荧光染料Deep Purple进行后染色(Post-stain)。DeCyder定量分析软件在每块凝胶上平均检测到1 200个以上蛋白斑点,每块胶上都匹配得到的相同蛋白质斑点有846个。其中有7个斑点丰度变化在50%以上,统计学意义显著(P值小于0.05)。利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-nESI MS/MS)成功鉴定5个表达上调的斑点分别为X染色体开放阅读框26(Cxorf26)、人辅分子伴侣23(PTGES3)、钙调蛋白(CALM3)、肌球蛋白轻链6(MYL6)和断裂点丛集区蛋白1(BANF1);2个表达下调蛋白斑点被鉴定为转录延伸因子B肽链2(TCEB2)和核糖体蛋白L23(RPL23)。除MYL6被报道与皮肤疾病相关外,其它蛋白与皮肤病变的关系有待研究。该研究得到的7个差异表达蛋白为DNBS类化学致癌物职业接触者皮肤病变研究提供了有价值的线索。关键词：2,4-二硝基苯磺酸;职业暴露;2D-DIGE;HPLC-nESIMS/MS;HaCaT
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发布时间： - 摘要：以镍(Ⅱ)离子为模板,丙烯酰胺为功能单体,二乙烯基苯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,甲醇为溶剂,采用本体聚合法制备了镍离子(Ⅱ)印迹聚合物。用红外光谱对镍离子印迹聚合物的结构进行表征,红外光谱研究表明聚合物中存在与模板分子相互作用的特征基团。通过研究Ni2+与单体的物质的量之比、单体与交联剂的物质的量之比、溶剂量对镍离子(Ⅱ)印迹聚合物吸附性能的影响,发现Ni2+与功能单体物质的量之比为1∶4,功能单体与交联剂物质的量之比为1∶5,溶剂体积为10 mL时制备的聚合物具有最佳吸附能力。结果表明该镍离子(Ⅱ)印迹聚合物对Ni2+具有良好的吸附性、选择性和亲和性,其最大吸附量为1.26 mg/g,与饱和吸附量Qmax=1.35 mg/g基本相符,达到吸附平衡的时间为35 min,最佳吸附pH=8.0,相对其它金属离子的相对选择系数(K′)远大于1,表明该镍离子印迹聚合物对镍离子有明显的选择识别能力,且重复性好。关键词：镍离子;离子印迹聚合物;选择性吸附
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发布时间： - 摘要：建立了竹笋中40种农药(包括有机磷类、有机氯类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类、三唑类和杂环类)残留的同时检测方法。样品以乙腈为提取溶剂,高速匀浆提取,经PSA固相萃取小柱净化,利用GC-MS/SIM进行测定。结果表明,40种农药在一定质量浓度范围内线性良好,相关系数为0.994 6~0.999 8。在0.050~2.0 mg/kg范围内的加标回收率为68%~119%,相对标准偏差为1.1%~20.0%,方法的定量下限(S/N=10)为0.01~0.05 mg/kg。该方法简便快速、准确可靠,适用于竹笋中农药多残留的同时检测。关键词：固相萃取;竹笋;农药残留;气相色谱-质谱法
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发布时间： - 摘要：建立了一种基于核酸适体（Aptamer）构象效应和荧光探针噻唑橙（TO）为荧光分子开关进行钾离子检测的光学方法。室温下钾离子可与Aptamer结合形成G 四面体结构，使双链解链变为四面体结构和单链，从而导致TO荧光强度降低。考察了TO浓度、反应温度及反应时间的影响。在最佳实验条件下，钾离子浓度在10×10-6～20×10-4 mol/L范围内与荧光强度降低比率（I0F-IF）/I0F呈良好的线性关系，检出限达33×10-7 mol/L；对Li+、Na+、Ca2+、Mg2+、NH+4离子进行对照实验的结果表明，该方法不仅具有较好的灵敏度和选择性，且无需荧光标记，操作简单、成本低。将该方法用于药品中钾离子含量的测定，其结果与原子吸收法一致。关键词：噻唑橙;钾离子;核酸适体
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发布时间： - 摘要：该文结合倒置显微镜、原子力显微镜（AFM）、CCK 8和流式细胞术定性定量研究了姜黄素对人肝癌细胞株HepG2细胞的毒性。AFM探测结果表明，姜黄素能够引起细胞发生不同程度的形变。细胞体积和高度均随细胞形变程度的加深而下降。细胞表面平均粗糙度（Ra）、均方根粗糙度（Rq）和粒径分布均随细胞形变程度的加深而增大。而AFM探测细胞机械性能发现，40 μmol/L姜黄素与HepG2细胞共孵育24 h后，细胞表面相对粘附力从(7084±2557)pN降至（2998±396）pN。CCK 8实验表明，细胞存活率与姜黄素存在时间依赖和剂量依赖关系。20~80 μmol/L姜黄素作用细胞24 h后，细胞存活率从（722±38）%降至（106±23）%；作用48 h后，细胞存活率从（536±27）%降至（87±18）%。流式细胞术对细胞周期的检测表明，姜黄素能够阻滞肝癌HepG2细胞于G2/M期。该实验对药物引起癌细胞早期凋亡的可视化诊断和研究药物与细胞相互作用有重要意义。关键词：原子力显微镜;姜黄素;细胞毒性;表面粗糙度;粘附力;超微结构
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发布时间： - 摘要：利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI MS/MS）技术，建立了果蔬中氯化胆碱、矮壮素、缩节胺、嘧啶醇、多效唑、烯效唑6种植物生长抑制剂残留的检测方法。考察了流动相组分和流动相添加剂对质谱离子化效率的影响以及提取溶剂、提取剂用量和固相萃取柱对萃取效率的影响。在优化条件下，6种目标化合物在10～2000 μg/L范围内线性良好（r＞099），空白样品中，加标水平为20、100、500 μg/kg 时，6种目标化合物的平均加标回收率为81%～104%，相对标准偏差均不大于50%，方法的检出限为015～035 μg/kg，定量下限为047～110 μg/kg。该方法具有灵敏度高、选择性好、回收率高且稳定等优点，用于实际果蔬样品中植物生长抑制剂的测定，结果满意。关键词：高效液相色谱-电喷雾质谱/质谱;植物生长抑制剂;残留
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发布时间： - 摘要：以镍（Ⅱ）离子为模板，丙烯酰胺为功能单体，二乙烯基苯为交联剂，偶氮二异丁腈为引发剂，甲醇为溶剂，采用本体聚合法制备了镍离子（Ⅱ）印迹聚合物。用红外光谱对镍离子印迹聚合物的结构进行表征,红外光谱研究表明聚合物中存在与模板分子相互作用的特征基团。通过研究Ni2+与单体的物质的量之比、单体与交联剂的物质的量之比、溶剂量对镍离子（Ⅱ）印迹聚合物吸附性能的影响，发现Ni2+与功能单体物质的量之比为1∶4，功能单体与交联剂物质的量之比为1∶5，溶剂体积为10 mL时制备的聚合物具有最佳吸附能力。结果表明该镍离子（Ⅱ）印迹聚合物对Ni2+具有良好的吸附性、选择性和亲和性，其最大吸附量为126 mg/g，与饱和吸附量Qmax=135 mg/g基本相符,达到吸附平衡的时间为35 min,最佳吸附pH=80,相对其它金属离子的相对选择系数（K′）远大于1，表明该镍离子印迹聚合物对镍离子有明显的选择识别能力，且重复性好。关键词：镍离子;离子印迹聚合物;选择性吸附
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发布时间： - 摘要：在模拟人体生理条件下，采用荧光光谱法研究了3种不同结构的苯丙胺类药物（麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱）与溶菌酶之间的相互作用，计算了其结合常数、结合位点数和热力学参数，并探讨了3种药物对溶菌酶构象的影响。研究发现，三者可对溶菌酶内源性荧光产生强烈的猝灭作用，其猝灭过程均为静态猝灭。麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱与溶菌酶均形成1∶1复合物，在308 K温度下的结合常数K分别为511×103、404×103、280×103 L?mol-1，结合距离r分别为0241、0350、0422 nm，与溶菌酶结合的焓变分别为-123、-126、-521 kJ?mol-1，熵变分别为-329、-339、-103 J?mol-1?K-1。研究结果表明，苯丙胺类药物的构型和取代基对其与溶菌酶的相互作用有重要影响，3种苯丙胺类药物与溶菌酶的作用力顺序为麻黄碱＞伪麻黄碱＞甲基麻黄碱，体系的主要作用力为氢键和范德华力。溶菌酶与3种药物的同步荧光光谱也表明，溶菌酶的构象在作用前后基本不变。关键词：麻黄碱;伪麻黄碱;甲基麻黄碱;溶菌酶;荧光光谱法;同步荧光光谱法
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发布时间： - 摘要：采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白，建立了人角质形成细胞HaCaT受2,4 二硝基苯磺酸（DNBS）刺激前后的双向胶内差异凝胶电泳（2D DIGE）图谱，每组平行样本数为3。凝胶采用蛋白荧光染料Deep Purple进行后染色（Post stain）。DeCyder定量分析软件在每块凝胶上平均检测到1 200个以上蛋白斑点，每块胶上都匹配得到的相同蛋白质斑点有846个。其中有7个斑点丰度变化在50%以上，统计学意义显著（P值小于005）。利用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-nESI MS/MS）成功鉴定5个表达上调的斑点分别为X染色体开放阅读框26（Cxorf26）、人辅分子伴侣23（PTGES3）、钙调蛋白（CALM3）、肌球蛋白轻链6（MYL6）和断裂点丛集区蛋白1（BANF1）；2个表达下调蛋白斑点被鉴定为转录延伸因子B肽链2（TCEB2）和核糖体蛋白L23（RPL23）。除MYL6被报道与皮肤疾病相关外，其它蛋白与皮肤病变的关系有待研究。该研究得到的7个差异表达蛋白为DNBS类化学致癌物职业接触者皮肤病变研究提供了有价值的线索。关键词：2,4 二硝基苯磺酸;职业暴露;2D DIGE;HPLC-nESI MS/MS;HaCaT
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发布时间： - 摘要：建立了加速溶剂萃取/气相色谱-质谱法（ASE/GC-MS）同时测定海洋沉积物中28种多氯联苯（PCBs）、16种多环芳烃（PAHs）和21种有机氯农药（OCPs）的分析方法。结果表明，ASE的最佳萃取温度为100 ℃，最佳静态时间为5 min。GC-MS同时分析65种化合物时，PAHs的线性范围为005~500 mg/L，线性系数（r2）为0991~0999；PCBs和OCPs的线性范围为50~5000 μg/L，r2不低于0996。PCBs、PAHs和OCPs的检出限分别为003~011、004~073、006~048 μg/kg,定量下限分别为011~035、012~242、018~161 μg/kg，平均加标回收率为70%~146%，方法的相对标准偏差（n=6）为12%~173%。经海洋沉积物标准参考物质验证，该方法高效、准确，适合海洋沉积物中65种化合物的同时定量分析。关键词：海洋沉积物;多氯联苯;多环芳烃;有机氯农药;同时测定
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发布时间： - 摘要：采用Sepax Nanofilm SEC 150色谱柱和自制窄分布聚丙烯酸标样，考察了不同无机盐及其离子强度、酸度等对不同相对分子质量的聚丙烯酸分离效果的影响。在此基础上确定了凝胶渗透色谱分离聚丙烯酸的最佳条件：以磷酸盐缓冲液（离子强度010 mol/L，pH=69）为流动相，流速10 mL/min，柱温25 ℃，试样的质量浓度为05～20 g/L，进样量50 μL。在优化实验条件下，可按分子大小实现对聚丙烯酸的分离。通过渐近校正法对自制聚丙烯酸标样的峰值相对分子质量定值，并对待测聚丙烯酸样品的相对分子质量及其分布进行测定。关键词：聚丙烯酸;相对分子质量;凝胶渗透色谱;非体积排除效应
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发布时间： - 摘要：建立了涂料中5种挥发性有机物（VOCs）的顶空气相色谱-质谱（HS/GC-MS）分析方法。对溶剂、平衡温度、平衡时间、GC-MS的分离检测等实验条件进行了优化。涂料样品经N,N 二甲基甲酰胺（DMF）-水（1∶1,体积比）溶解分散，经90 ℃、90 min静态顶空后，通过DB VRX色谱柱分离和质谱检测，外标法定量。结果表明，方法的线性范围为0013 3~667 mg/L，5种VOCs的定量下限（LOQ）不高于10 mg/kg，平均加标回收率为82%~105%，相对标准偏差（RSD）为05%~39%。将该法用于市售22种溶剂型涂料和31种水性涂料中5种VOCs含量的测定，部分样品被检出。该方法简单快速、准确灵敏，适用于实际样品中5种VOCs的检测。关键词：顶空气相色谱-质谱法;挥发性有机物;涂料
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发布时间： - 摘要：建立了尿中除草剂莠去津（ATRZ)代谢物去乙基莠去津（DEA)、去异丙基莠去津（DIA)及去乙基去异丙基莠去津（DDA)的分析方法。尿样加入内标2 氨基 4 甲氧基 6 甲基 1,3,5 三氮嗪（AMMT)，碱化后用高极性GDX501大孔树脂吸附、乙酸乙酯洗脱进行固相萃取，萃取物在乙腈溶剂中用N 甲基 N 特丁二甲硅烷基三氟乙酰胺（MTBSTFA)进行衍生化，衍生物进行选择离子监测气相色谱-质谱联用法分析。ATRZ不发生特丁二甲硅烷基（TBDMS）衍生化，则以非衍生化形式同时进行分析。尿中DEA、DIA、DDA、ATRZ的萃取率分别为80%、78%、71%和85%，检出限分别为02、02 、01、1 μg/L。尿样中ATRZ的3种代谢物质量浓度在05~100 μg/L范围内，ATRZ在5~1 000 μg/L范围内线性关系良好。在1、50 μg/L加标水平下3种代谢物的回收率分别为97%~103%和98%~101%，相对标准偏差分别为92%~117%和52%~89%；空白尿中添加10 μg/L和500 μg/L ATRZ的回收率分别为101%和99%，相对标准偏差分别为127%和67%。该方法灵敏度高，可以分析莠去津中毒者和职业接触莠去津者尿中的莠去津及其代谢物。关键词：除草剂;莠去津;尿;气相色谱质谱联用法;固相萃取法;硅烷基衍生化法
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发布时间： - 摘要：研究了拉莫三嗪在玻碳电极上的电化学修饰及其修饰电极的电化学行为。在H2SO4介质中，采用循环伏安法制备了聚拉莫三嗪膜修饰玻碳电极（PLTG/GCE），用交流阻抗技术对修饰层进行表征。研究发现，该电极对NO-2具有明显的电催化氧化作用和灵敏的电流响应，NO-2的氧化峰电流与其浓度在96×10-6 ~ 11×10-3 mol?L-1范围内呈良好的线性关系，相关系数（r）为0998 8，检出限为32×10-6 mol?L-1。该方法用于实际水样中NO-2含量的测定，结果满意。关键词：聚拉莫三嗪膜;玻碳电极;NO-2;电催化
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发布时间： - 摘要：建立了固相萃取/高效液相色谱法测定西瓜中24 二氯苯氧乙酸(24 D)、赤霉素(GA3)、多效唑(PP333)、6 苄氨基嘌呤(6 BA) 4种植物生长调节剂残留的方法。样品用80%甲醇溶液提取，采用Strata C18固相萃取小柱进行富集、净化，以甲醇-015%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，经ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱(46 mm×150 mm,5 μm)分离，紫外检测器检测，检测波长为220 nm，以保留时间和紫外扫描图谱定性，外标法定量。在优化实验条件下，4种植物生长调节剂的标准溶液在05~10 mg/L范围内呈良好线性,r均大于0999，检出限为005~015 mg/kg。4种化合物在100、300 mg/kg 加标水平下的回收率为82%~90%，相对标准偏差均不高于38%。结果表明，该方法具有操作简便、回收率高、精密度好和灵敏度高等特点，适于水果中24 D、GA3、PP333、6 BA 残留的分析。关键词：高效液相色谱法;固相萃取;24 二氯苯氧乙酸;赤霉素;多效唑;6 苄氨基嘌呤;残留
- 1915
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发布时间： - 摘要：应用傅立叶变换近红外光谱技术，建立了评价涪陵榨菜品质的定量分析模型。测定了58份涪陵榨菜的近红外光谱数据，通过光谱预处理方法消除噪声，以偏最小二乘法(PLS)建立回归模型。最终得到评价其品质的水分、总酸(以乳酸计)和氨基酸含量近红外光谱分析模型的决定系数(R2)依次为0957 8、0975 4、0950 4，交叉验证均方差(RMSECV)依次为0107、0017 1、0036 3。用该模型对18份未知涪陵榨菜样本进行外部验证，其水分、总酸和氨基酸外部验证的决定系数依次为0956 2、0953 9、0946 0，预测集标准偏差(RMSEP)依次为0256、0034 7、0038 8。内部交叉验证和外部验证均证明，近红外定量分析有较高的准确度，能满足生产中对涪陵榨菜品质检测的精度要求。关键词：近红外光谱法;涪陵榨菜;水分;总酸;氨基酸
- 1837
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发布时间： - 摘要：采用具有高气体渗透性和紫外光透过性的无定形聚四氟乙烯管（Teflon AF 2400）作为蒸气发生原子荧光系统的气液分离器和检测池，建立了微型化汞蒸气发生原子荧光检测系统。考察了Teflon AF 2400管长度、还原剂种类和浓度、酸介质种类和浓度、进样流速以及氩气流速对测量体系的影响。在优化实验条件下，该方法的线性范围为007~10 μg/L（r=0998 0），检出限为002 μg/L，相对标准偏差（n=11）为33%。该系统体积小、样品消耗少、灵敏度高。方法已成功应用于卷烟样品中汞含量的检测，回收率为97%~102%。关键词：Teflon AF 2400管;原子荧光;汞;烟草
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发布时间： - 摘要：通过逐步聚合反应制备了一种新型整体式吸附萃取搅拌棒，将其应用于环境水中镉离子的吸附萃取。考察了介质酸度、搅拌速率、吸咐时间、解吸溶剂和时间等实验条件对吸附量的影响。控制溶液pH为60，搅拌棒转速为300 r/min，吸附30 min，5% HNO3作为解吸液解吸10 min，采用等离子体原子发射光谱仪对Cd离子进行检测。该方法在01~50 mg/L的Cd离子质量浓度范围内呈较好的线性关系，相关系数为0997 2。相对标准偏差和检出限(3σ)分别为46%和38 μg?L-1，加标回收率为97%~104%。表明该方法具有较好的重复性和可靠性。关键词：搅拌棒;镉离子;整体柱材料;环境水样
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发布时间： - 摘要：建立了以离子液体为添加剂的反向微乳毛细管电泳（IL-MEEKC）法分离测定化妆品中氢化可的松、泼尼松和醋酸氢化可的松3种糖皮质激素的方法。微乳毛细管电泳的最佳缓冲体系组成为：24% SDS+66%正丁醇+05%正辛烷+35 mmol/L BMIM-BF4+20 mmol/L磷酸二氢钠缓冲液（pH 22）；运行电压-20 kV，检测波长250 nm。在优化实验条件下，氢化可的松、泼尼松和醋酸氢化可的松分别在5~400、5~400、5~800 mg?L-1范围内线性良好，检出限（S/N=3）分别为09、09、12 mg/L，相对标准偏差不大于43%，平均加标回收率分别为102%、97%和94%。结果表明，利用离子液体作为添加剂的反向微乳毛细管电泳方法分离3种糖皮质激素比常规的MEEKC具有更高的分离度。该方法快速、灵敏、有效，已成功用于实际样品中糖皮质激素的检测。关键词：微乳毛细管电泳;糖皮质激素;离子液体;化妆品
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发布时间： - 摘要：高产率合成了一种新的Schiff base结构化合物，并将其表征为高选择性聚合物膜汞离子选择性电极载体。考察了不同增塑剂及离子交换剂对膜电极响应性能的影响，在最佳膜组分条件下测得该电极对汞离子的线性响应范围为10×10-6~30×10-4 mol/L，响应斜率为(293±03) mV/dec，检出限为26×10-7 mol/L；该电极响应速率快（小于12 s），可在较宽的pH范围内（pH 28~56）使用，且其它常见碱金属、碱土金属以及过渡金属离子对该测试电极的干扰小；可准确检测自来水中汞离子的浓度。关键词：离子选择性电极;汞离子;Schiff base
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发布时间： - 摘要：建立了气相色谱电子捕获器法检测卷烟抽吸过程中氟节胺向主流烟气总粒相物中转移量的方法，卷烟在标准条件下抽吸，用剑桥滤片捕集主流烟气总粒相物，经乙腈提取、石墨碳黑固相萃取柱或自制混合层析柱净化、GC/ECD检测后，外标法定量。氟节胺在002~20 mg/L范围内线性关系良好，检出限为914×10-6 g/L。加标量为30 μg/包时，卷烟抽吸过程中氟节胺向主流烟气总粒相物中转移量的平均加标回收率为88%~93%，相对标准偏差（RSD）为15%~28%，空白加标的平均回收率为94%~100%，相对标准偏差（RSD）为14%~24%。与传统的氟节胺检测方法相比，该方法操作简单、快速，准确性好且环保，可满足烟草中农药向主流烟气总粒相物中转移量的检测要求。关键词：主流烟气总粒相物;石墨碳黑固相萃取柱;自制混合层析柱;氟节胺;转移量;气相色谱
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发布时间： - 摘要：该文以转基因食品黑花生为研究对象，针对硒易挥发的特点，建立了高压密闭消解-石墨炉原子吸收光谱法测定黑花生中总硒含量的测定方法。研究表明，HNO3-H2O2可使样品达到最佳消解，以Pd（NO3）2+Mg（NO3）2为基体改进剂，最佳灰化温度和原子化温度分别为500 ℃和2 000 ℃。在优化实验条件下，该方法测定硒的线性范围为10~200 μg?L-1，检出限（3σ）为878 μg?L-1，空白样品的相对标准偏差（n=11）为46%，回收率为96%～113%。测定发现，黑花生果仁及包衣中均富含硒，且含量高于同一产地出产的另外两个品种。关键词：石墨炉原子吸收法;黑花生;硒
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发布时间： - 摘要：建立了同时测定香兰素和邻位香兰素的高效液相色谱法。考察了流动相组成、柱温等因素对分析效率的影响。在流动相为5% 乙酸-乙腈（60∶40，体积比），流速10 mL/min，柱温25 ℃的优化条件下，香兰素和邻位香兰素可在5 min内实现分离。测定结果表明，香兰素和邻位香兰素在10~240 mg/L范围内线性关系良好，相关系数均为0999 7；方法的检出限（S/N=3）分别为006、002 mg/L；样品的加标回收率为99%~102%，相对标准偏差为02%~06%。该方法操作简单、快速，用于实际样品的分析，结果满意。关键词：高效液相色谱法;香兰素;邻位香兰素;同分异构体
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发布时间： - 摘要：使用自行设计的毛细管电泳柱端安培检测系统，采用非水介质毛细管电泳法对野菊花中蒙花苷的含量进行测定。考察了缓冲溶液浓度及其pH值、非水介质的浓度、检测电位对测定的影响。在优化实验条件下，蒙花苷的质量浓度在20～80 mg/L范围内与峰高呈良好的线性关系，线性系数为0999 6，检出限为020 mg/L，平均加标回收率为99%。关键词：毛细管电泳;蒙花苷;安培检测
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发布时间： - 摘要：采用微波灰化技术消解残渣燃料油，用全谱直读DUO-ICP-AES同时测定残渣燃料油中的铝、硅、钒，优化了仪器工作参数和实验条件。结果表明，在质量浓度0~250 mg/L范围内铝、硅、钒的线性关系良好（r=0999 70~0999 99）,检出限、回收率和相对标准偏差分别为0005~0050 mg/L、88%~97%和10%~35%。该方法快速简便，可应用于残渣燃料油中铝、硅、钒的日常检验。关键词：双向视电感耦合等离子体原子发射光谱;微波灰化;残渣燃料油
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发布时间：
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