稻瘟灵单克隆抗体的制备及评价

王幸幸; 王耀宇; 李晓娜; 申超群; 周凯; 张静

doi:10.19969/j.fxcsxb.22042201

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稻瘟灵单克隆抗体的制备及评价

实验技术与方法 | 更新时间：2023-01-04

- 稻瘟灵单克隆抗体的制备及评价
- Fabrication and Characterization of Monoclonal Antibody Against Isoprothiolane
- 分析测试学报 2022年41卷第11期页码：1696-1701
- 作者机构：
  
  1.深圳市通量检测科技有限公司，广东深圳 518038
  2.九江学院江西油茶研究研究中心，江西九江 332005
  3.烟台海关技术中心，山东烟台 264000
- 作者简介：
  
  周凯，博士，讲师，研究方向：食品安全检测，E - mail：zhoukaitougao@163.com
- 基金信息：
  
  江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ211804);深圳市同类检测科技有限公司科研（建设）项目(RD20210001)
- DOI：10.19969/j.fxcsxb.22042201
  中图分类号：
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王幸幸,王耀宇,李晓娜等.稻瘟灵单克隆抗体的制备及评价[J].分析测试学报,2022,41(11):1696-1701.

WANG Xing-xing,WANG Yao-yu,LI Xiao-na,et al.Fabrication and Characterization of Monoclonal Antibody Against Isoprothiolane[J].Journal of Instrumental Analysis,2022,41(11):1696-1701.
王幸幸,王耀宇,李晓娜等.稻瘟灵单克隆抗体的制备及评价[J].分析测试学报,2022,41(11):1696-1701. DOI： 10.19969/j.fxcsxb.22042201.

WANG Xing-xing,WANG Yao-yu,LI Xiao-na,et al.Fabrication and Characterization of Monoclonal Antibody Against Isoprothiolane[J].Journal of Instrumental Analysis,2022,41(11):1696-1701. DOI： 10.19969/j.fxcsxb.22042201.

摘要

该文制备了农药稻瘟灵的单克隆抗体，并建立了稻瘟灵的酶联免疫吸附（ELISA）检测方法。在完全保留稻瘟灵结构的基础上从二硫杂环戊烷结构中衍生不同长度的活性手臂制备了2个半抗原，并分别与载体蛋白偶联合成免疫原与包被原。通过小鼠免疫、细胞融合、淘筛、腹水制备等步骤获得特异性识别稻瘟灵的单克隆抗体mAb－DWL。结果显示，基于mAb－DWL构建的间接竞争ELISA法的半抑制浓度（IC,50,）为55.2 ng/mL，线性范围为4.6 ~ 530.2 ng/mL，其与结构类似物的交叉反应可忽略不计。所建立的ELISA方法对蔬菜及粮食等样品的加标回收率为77.2% ~ 116%，可用于实际样品的快速检测。

Abstract

An enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA） method based on the monoclonal antibody was established for determination of pesticide isoprothiolane．Two haptens were prepared by extending active arms of different lengths from disulfide heterocyclic pentane structure of isoprothiolane molecule．The two haptens were conjugated with carrier protein to obtain the immunogen and coating antigen．Monoclonal antibody，named mAb－DWL，against isoprothiolane was obtained via the procedures of mouse immunization，cell fusion，eluting sieve and ascites collection．Results showed that the ELISA based on the obtained mAb－DWL exhibited a linear range of 4.6－530.2 ng/mL，with an IC,50, of 55.2 ng/mL．Meanwhile，the cross-reactivity rates for the mAb－DWL with other similar pesticides were lower than 1%．The spiked recoveries for isoprothiolane in the vegetables and grains samples ranged from 77.2% to 116%．The monoclonal antibody prepared by this method could be used for development of rapid method for isoprothiolane determination.

关键词

稻瘟灵单克隆抗体酶联免疫吸附检测农药

Keywords

isoprothiolanemonoclonal antibodyELISApesticide

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