将L-脯氨酸通过3-缩水甘油丙基三甲氧基硅烷键合到球型多孔硅胶基质上,制备了手性配体交换色谱固定相。采用高压匀浆法将制备的填料填充到毛细管柱中,在自组装的毛细管液相色谱仪上对3种α-氨基酸对映体进行了拆分。利用Box-Behnken设计对影响因素(流动相中乙腈的体积分数、中心离子Cu2+的浓度、流速)进行优化,以最大保留时间和分离度为响应值,借助二次多元回归方程,建立了相应的数学模型。响应曲面图表明:DL-天冬酰胺在5%乙腈、5 mmol/L Cu2+、流速0.139μL/min,苏氨酸在10%乙腈、5mmol/L Cu2+、流速0.167μL/min,丝氨酸在5%乙腈、7 mmol/L Cu2+、流速0.167μL/min的条件下均能得到基线分离。表明通过所制备的手性固定相,采用配体交换色谱模式可获得拆分DL-氨基酸的理想效果。