Determination of Cryoprotectants and Nutrients in Vitrification Solution by High Performance Liquid Chromatography with Refractive Index Detector

FENG Xia-lan; ZHAO Xin-qing; PU Xiao-cong; TANG Min; ZHANG Rong-qin

doi:10.12452/j.fxcsxb.250312182

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Determination of Cryoprotectants and Nutrients in Vitrification Solution by High Performance Liquid Chromatography with Refractive Index Detector

Experimental Techniques and Methods | 更新时间：2025-12-03

- Determination of Cryoprotectants and Nutrients in Vitrification Solution by High Performance Liquid Chromatography with Refractive Index Detector
- Journal of Instrumental Analysis Vol. 44, Issue 12, Pages: 2619-2623(2025)
- 作者机构：
  
  1.成都市药品检验研究院，四川省药品监督管理局化学药品质量研究与控制重点实验室，四川成都 610041
  2.四川省药品检验研究院，四川省医疗器械检测中心，四川成都 610097
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.12452/j.fxcsxb.250312182
  CLC： O657.7;R917
- Received：12 March 2025，
  
  Revised：2025-04-14，
  
  Accepted：29 April 2025，
  
  Published Online：22 October 2025，
  
  Published：15 December 2025
- 稿件说明：
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冯霞兰,赵欣庆,蒲小聪,唐敏,张蓉琴.高效液相色谱-示差折光检测器法测定玻璃化冷冻液中保护剂和营养物质的含量[J].分析测试学报,2025,44(12):2619-2623.

FENG Xia-lan,ZHAO Xin-qing,PU Xiao-cong,TANG Min,ZHANG Rong-qin.Determination of Cryoprotectants and Nutrients in Vitrification Solution by High Performance Liquid Chromatography with Refractive Index Detector[J].Journal of Instrumental Analysis,2025,44(12):2619-2623.
冯霞兰,赵欣庆,蒲小聪,唐敏,张蓉琴.高效液相色谱-示差折光检测器法测定玻璃化冷冻液中保护剂和营养物质的含量[J].分析测试学报,2025,44(12):2619-2623. DOI： 10.12452/j.fxcsxb.250312182.

FENG Xia-lan,ZHAO Xin-qing,PU Xiao-cong,TANG Min,ZHANG Rong-qin.Determination of Cryoprotectants and Nutrients in Vitrification Solution by High Performance Liquid Chromatography with Refractive Index Detector[J].Journal of Instrumental Analysis,2025,44(12):2619-2623. DOI： 10.12452/j.fxcsxb.250312182.

摘要

建立了高效液相色谱-示差折光检测器（HPLC-RID）法同时测定玻璃化冷冻液中4种保护剂和2种营养物质的含量。以0.01 mol/L硫酸溶液为流动相进行洗脱，采用BIO-RAD Aminex HPX-87H（300 mm×7.8 mm，9 μm）色谱柱分离，示差折光检测器（RID）检测，外标法定量。结果表明，在优化的色谱条件下，6种待测组分能有效分离，且在各自考察的质量浓度范围内线性关系良好，相关系数（

）均不小于0.999 9，检出限（LOD）和定量下限（LOQ）分别为0.009~0.025 mg/mL和0.030~0.085 mg/mL。阴性样品在低、中、高3个浓度水平下的平均加标回收率为99.8%~103%，相对标准偏差（RSD，

=3）为0.20%~1.8%。该方法简便、专属性强、准确度高，适用于玻璃化冷冻液中保护剂和营养物质的含量测定。

Abstract

A method for determination of four cryoprotectants and two nutrients in vitrification solution was developed by

high performance liquid chromatography with refractive index detector（HPLC-RID）. The samples were eluted by using 0.01 mol/L sulfuric acid as mobile phase，and the chromatographic separation was carried out on the BIO-RAD Aminex HPX-87H column（300 mm × 7.8 mm，9 μm）. Refractive index detector（RID） was used for detection and the external standard method was applied for quantitative determination. Under this specific condition，the samples were well separated and showed good linear relationships with the correlation coefficients（

） not less than 0.999 9. The limits of detection（LODs） and the limits of quantification（LOQs） were 0.009-0.025 mg/mL and 0.030-0.085 mg/mL，respectively. The average spiked recoveries of the negative samples at three concentration levels were from 99.8% to 103%，and relative standard deviations（RSDs，

=3） were between 0.20% and 1.8%. The method is simple，specific，accurate and suitable for the determination of cryoprotectants and nutrients in vitrification solution.

关键词

Keywords

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