建立了离子对高效液相色谱法分离与测定复方制剂（新灭菌）中的羟氨苄青霉素及氟氯青霉素含量法。采用Ｃ８．１０μｍ，４．６×２００ｍｍ柱（大连化物所Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ），以含１．４％十六烷基三甲基溴化铵的ｐＨ６．５磷酸盐缓冲液－乙腈（６８＋３２）为流动相，在紫外检测器２５４ｎｍ波长处检测，线性范围为０．２５～２ｍｇ／ｍＬ，ｒ＝０．９９９９（ｎ＝５），羟氨苄青霉素及氟氯青霉素平均回收率分别为９９．５％及１００．７％（ｎ＝５）。精密度：羟氨苄青霉素及氟氯青霉素日内（４ｈ）平均ＲＳＤ（相对标准偏差）均为０．８％（ｎ＝１５），日间（２ｈ）平均ＲＳＤ分别为０．６％和０．７％（ｎ＝３）。