Análisis de metabolitos de ácidos biliares en suero de pacientes con diabetes tipo 2 basado en UPLC-MS/MS

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摘要

Aplicación de un método metabolómico basado en cromatografía líquida ultraeficiente acoplada a espectrometría de masas en tándem (UPLC-MS/MS) para detectar el perfil metabólico de los ácidos biliares en suero de pacientes con diabetes tipo 2, obteniendo biomarcadores metabólicos y descubriendo posibles objetivos preventivos y terapéuticos para predecir la diabetes. Se utilizó una columna Waters ACQUITY UPLC BEH C18 (150 mm×2.1 mm, 1.7 μm) para la separación, con una fase móvil de solución acuosa al 0.05% de ácido acético y acetonitrilo, y un flujo de 0.40 mL/min en eluir por gradiente. Este método midió el perfil metabólico de los ácidos biliares en el suero de 30 pacientes diabéticos y 50 personas normales. Se logró una buena separación de 41 estándares de ácidos biliares en 30 minutos, cada componente mostró una buena relación lineal dentro de un rango determinado de concentración, los límites de detección (LOD) fueron de 0.24~7.81 nmol/L, los límites de cuantificación (LOQ) de 0.49~15.63 nmol/L, con coeficientes de correlación (r2) de 0.9867~0.9997. El perfil metabólico de ácidos biliares en suero mostró correlación entre los dos grupos, mediante análisis discriminante ortogonal de mínimos cuadrados parciales (OPLS-DA) se encontraron 12 ácidos biliares (incluyendo ácido glicocólico, ácido glicoglicólico, ácido tauroursodesoxicólico, ácido biliar, ácido desoxicólico, ácido glicoursodesoxicólico, ácido glicodesoxicólico, ácido 12-cetolitocólico, ácido ursodesoxicólico, ácido desoxicólico, ácido isocólico, ácido cólico) que llevaban información importante para agrupar. Combinando el análisis del receptor operativo característico (ROC) de los sujetos, se obtuvieron finalmente 6 biomarcadores metabólicos de ácidos biliares: ácido tauroursodesoxicólico (AUC=0.68), ácido glicoursodesoxicólico (AUC=0.66), ácido glicocólico (AUC=0.63), ácido biliar (AUC=0.63), ácido desoxicólico (AUC=0.63), ácido glicodesoxicólico (AUC=0.58), que tienen valor potencial en investigación científica y clínica para el diagnóstico temprano y estudio profundo de la diabetes.

关键词

cromatografía líquida ultraeficiente acoplada a espectrometría de masas en tándem (UPLC-MS/MS); metabolismo de ácidos biliares; diabetes tipo 2; suero

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