Estudio metabolómico no dirigido de células leucémicas y células resistentes basado en la combinación de cromatografía líquida ultrarrápida y espectrometría de masas con trampa de iones y tiempo de vuelo

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摘要

Se estableció un método metabolómico no dirigido basado en la combinación de cromatografía líquida ultrarrápida, trampa de iones y espectrometría de masas de tiempo de vuelo (UPLC-IT-TOF MS) para estudiar las diferencias metabólicas entre células humanas de leucemia mieloide crónica y sus células resistentes a la doxorrubicina (K562 y K562-ADM). Se examinó el efecto del método de ruptura celular, el sistema de disolventes de extracción y el volumen del solvente en la efectividad de extracción de metabolitos celulares. Los experimentos mostraron que la ruptura ultrasónica con una extracción de 800 μL de metanol al 80% produjo un mayor número de picos característicos de metabolitos, con alta reproducibilidad y estabilidad del método. El método desarrollado se aplicó para estudiar las diferencias metabólicas entre las células K562 y K562-ADM, con análisis de componentes principales (PCA) y análisis discriminante por mínimos cuadrados parciales ortogonales (OPLS-DA) de los datos obtenidos. Los resultados mostraron diferencias metabólicas significativas entre los dos tipos celulares y se identificaron 40 metabolitos que contribuyen significativamente a la clasificación. Los metabolitos diferenciados participan principalmente en las vías metabólicas de aminoácidos, esfingolípidos, purinas y pirimidinas. Este método puede utilizarse para estudiar las diferencias metabólicas entre las células K562 y K562-ADM y podría ayudar en la investigación metabolómica de la resistencia celular en leucemia.

关键词

células leucémicas; metabolómica no dirigida; cromatografía líquida ultrarrápida - espectrometría de masas; resistencia a la doxorrubicina

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