Estudio del chip de detección de gotículas PCR basado en detección conductimétrica sin contacto

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摘要

La PCR digital es una técnica de análisis cuantitativo absoluto emergente tras la PCR cuantitativa en tiempo real, ampliamente utilizada en la detección y diagnóstico temprano de enfermedades y en el análisis microbiológico. Sin embargo, en la etapa de detección del microreactor de la PCR digital, los métodos ópticos convencionales requieren equipos ópticos complejos, tienen un entorno de aplicación limitado y un alto costo. Por ello, se estudió un chip de detección de gotículas PCR basado en una detección conductimétrica sin contacto, que sustituye la detección óptica tradicional por detección conductimétrica, reduciendo eficazmente el costo del sistema de lectura de resultados de la PCR digital. Mediante la optimización de la estructura y disposición de los electrodos, utilizando una estructura de 3 electrodos paralelos en 3D, se redujo el error relativo, se mejoró la sensibilidad y se logró la detección sin marcado de la proporción de gotículas positivas y negativas en la reacción PCR. Se logró una buena correlación (r2=0.998) para una concentración de plantilla de ADN entre 0.5×10^4 y 3×10^4 copias/μL, con una capacidad de detección de hasta 100 gotas por segundo.

关键词

PCR digital;gotículas;sin marcado;detección conductimétrica sin contacto

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