Basado en la cromatografía bidimensional fuera de línea y el análisis con exoglicosidasas, se estableció un método eficaz y confiable para la identificación estructural de las cadenas N de glicoproteínas. Primero se utilizó cromatografía de intercambio aniónico débil para preparar cadenas con diferentes niveles de ácido siálico, luego se combinó la electroforesis capilar inducida por láser con fluorescencia (CE-LIF) con exoglicosidasas para la identificación estructural de las cadenas. Después de etiquetar fluorescente las cadenas separadas, se realizó una digestión de arriba hacia abajo (top-down digestion) y una identificación estructural de abajo hacia arriba (bottom-up identification), detectándose un total de 18 tipos de glicanos en IgG. La estrategia se aplicó además para el análisis de cadenas N en suero humano, encontrando que las cantidades relativas de cadenas con diferentes niveles de sialilación eran S1∶S2∶S3∶S4=4.7∶20.9∶6∶1. Los resultados muestran que las cadenas neutras de alta abundancia en suero humano son muy similares a las cadenas neutras en IgG, y que el glicano N más abundante en suero es FA2G2S2 disialilado de dos antenas. Este método tiene un cierto potencial de aplicación en la caracterización estructural de las cadenas N de glicoproteínas.

cromatografía bidimensional fuera de línea; electroforesis capilar; inmunoglobulina G; cadenas N; suero humano