Estrategia de crecimiento de ADN en interfaz nano basada en transferasa desoxirribonucleotidil terminal y estudio de construcción de sensor aptámero para enrofloxacina

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摘要

Después de ensamblar ADN con grupo tiol en la superficie de nanopartículas de oro (AuNPs) para preparar una sonda biológica AuNPs-DNA, la transferasa desoxirribonucleotidil terminal (TdTase) cataliza el crecimiento del ADN en el extremo 3′-OH de la sonda, obteniendo largas cadenas simples de ADN (ssDNA). La sonda y el ssDNA fueron caracterizados mediante electroforesis en gel de agarosa y microscopía de fuerza atómica (AFM), y los resultados mostraron que TdTase puede lograr un crecimiento eficiente de ADN en la interfaz nano, con cadenas de hasta 850 nm en estado enrollado. Posteriormente, se combinó esta estrategia de crecimiento de ADN con la técnica de aptámeros. Primero se ensambló el fragmento de aptámero 1 en la superficie de oro nanoestructurado y el fragmento de aptámero 2 en partículas magnéticas funcionalizadas con grupos aldehído, construyendo así un biosensor aptámero para enrofloxacina (ENR). Este sensor mostró buen rendimiento de respuesta para ENR en un rango de 10 a 1,0×10^5 ng/mL, con un límite de detección de 1,0 ng/mL, y pudo distinguir claramente las señales del grupo control como ciprofloxacino, ofloxacino y norfloxacino. El estudio demostró que el sensor aptámero basado en TdTase es fácil de operar, tiene buena respuesta y especificidad molecular objetivo, y puede ofrecer nuevas ideas de investigación para campos como la seguridad alimentaria.

关键词

sonda biológica nano; transferasa desoxirribonucleotidil terminal (TdTase); crecimiento de ADN; sensor aptámero; enrofloxacina

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