Estudio del rendimiento del microreactor de tripsina basado en cromatografía capilar electrocinética con matriz de óxido de grafeno

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摘要

Basado en las excelentes propiedades fisicoquímicas del grafeno, se modificó la pared interna de un capilar de cuarzo con óxido de grafeno mediante un método de ensamblaje en capas, y se preparó una cromatografía capilar electrocinética con matriz de óxido de grafeno, caracterizada mediante electroosmosis, espectroscopía Raman, entre otros. Sobre esta base, utilizando la unión iónica, la tripsina fue inmovilizada en la punta de la columna capilar para preparar un microreactor de tripsina. La combinación de ambos constituyó un microreactor de tripsina de cromatografía capilar electrocinética. Los resultados experimentales mostraron que el óxido de grafeno, como matriz, puede mejorar la eficiencia de separación de la muestra y también promover el rendimiento catalítico de la tripsina. La resolución de separación de la mezcla de N-benzoil-L-arginina éster etílico clorhidrato (BAEE) y N-benzoil-L-arginina (BA) aumentó de 3.70 en el capilar desnudo a 4.71 en el capilar modificado con óxido de grafeno, y la actividad enzimática inmovilizada (constante de Michaelis Km = 1.10 mmol/L, velocidad máxima Vmax = 0.32 mmol/L/s) fue claramente superior a la del capilar desnudo (Km = 109.77 mmol/L, Vmax = 0.00046 mmol/L/s). Usando el microreactor preparado, se seleccionaron componentes activos inhibidores de tripsina entre 10 hierbas chinas, encontrándose que tanto Sanqi como Da Huang contienen compuestos activos inhibidores de tripsina.

关键词

Microreactor enzimático; Óxido de grafeno; Cromatografía capilar electrocinética; Tripsina; Inhibidores

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