Estudio por RMN del mecanismo de regulación ácido-base de la histidina quinasa HK853

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摘要

El sistema de señalización de dos componentes es un sistema importante que las bacterias utilizan para responder a estímulos externos y regular sus actividades fisiológicas. La histidina quinasa es una parte fundamental de este sistema; la mayoría de las histidina quinasas son multifuncionales: no solo pueden autofosforilarse y transferir el grupo fosfato a la proteína reguladora de respuesta (Response regulator, RR) para su fosforilación, sino que también pueden catalizar la desfosforilación de RR. Las investigaciones han mostrado que la función de la histidina quinasa HK853 está regulada por el pH. Este artículo utiliza un método de marcado isotópico selectivo y mediante técnicas de RMN se estudiaron los sitios clave de aminoácidos que participan en la interacción entre HK853 y RR468. Se encontró que el valor de pKa de la cadena lateral de His260 en el dominio DHp está bien relacionado con la actividad fosfatasa de HK853. Después de formarse el complejo entre HK853 y el sustrato, el valor de pKa disminuye, haciendo que la cadena lateral de His260 sea más susceptible a la desprotonación, lo que contribuye a aumentar la actividad fosfatasa de HK853. Se esclareció el mecanismo de regulación ácido-base en la función fosfatasa de HK853.

关键词

Resonancia magnética nuclear; marcado isotópico selectivo; sistema de señalización de dos componentes; fosforilación; histidina quinasa

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