Biosensor electroquímico basado en una sonda nanométrica tetraédrica de ADN para la detección de metilación de ADN

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摘要

Este artículo utiliza una sonda de nanostructura tetraédrica de ADN (TSP) como sonda capturadora, donde los anticuerpos IgG marcados con peroxidasa de rábano picante (AuNPs-IgG-HRP) se combinan en la superficie de nanopartículas de oro como moléculas señal, para construir un nuevo sensor electroquímico de metilación de ADN. Después del ensamblaje del TSP mediante un método de desnaturalización térmica en un solo paso, se fija en la superficie del electrodo de oro modificado con nanopartículas de oro a través del enlace Au—S. Tras la hibridación con el ADN objetivo, la unión del anticuerpo 5-metilcitosina (5-mc) y AuNPs-IgG-HRP, se realiza la detección mediante voltametría de pulso diferencial (DPV). Se utilizan voltametría cíclica (CV) y espectroscopía de impedancia electroquímica (EIS) para caracterizar electroquímicamente el proceso de construcción del electrodo modificado. Se investigaron los efectos del tiempo de hibridación, la concentración del anticuerpo 5-mc, el volumen de adición de IgG-HRP y las concentraciones de hidroquinona (HQ) y peróxido de hidrógeno (H2O2) sobre el sensor. Bajo condiciones óptimas, el rango lineal de respuesta del sensor para ADN metilado es de 1.0×10-15~1.0×10-10 mol/L, con un límite de detección (S/N=3) de 4.4×10-16 mol/L. Este sensor presenta buena selectividad y estabilidad, proporcionando un nuevo método para la detección de metilación de ADN.

关键词

Sonda nanométrica tetraédrica de ADN; sensor electroquímico; metilación de ADN; nanopartículas de oro; anticuerpos

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