Método de cromatografía líquida ultrarrápida acoplada a espectrometría de masas en tándem con trípode de cuadrupolos para determinar α-lactoalbúmina y β-lactoglobulina en polvo de proteína de suero

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摘要

Se estableció un método analítico mediante cromatografía líquida ultrarrápida acoplada a espectrometría de masas en tándem con trióxido de cuadrupolo (UPLC-MS/MS) para determinar α-lactoalbúmina (α-La) y β-lactoglobulina (β-Lg) en polvo de proteína de suero. Las muestras se alquilaron con iodoacetamida y luego se digirieron enzimáticamente con tripsina alcalina. La separación se realizó en una columna Waters ACQUITY UPLC-BEH C18, 300 , con fases móviles de agua con 0.1% de ácido fórmico y acetonitrilo con 0.1% de ácido fórmico, con elución en gradiente y detección en modo de monitoreo múltiple de reacciones (MRM) de iones positivos; la cuantificación se realizó mediante método de estándar interno. Los resultados mostraron que la α-lactoalbúmina y la β-lactoglobulina mostraron buena linealidad en los rangos de 40 a 1,000 nmol/L y de 80 a 2,000 nmol/L respectivamente, con un límite de cuantificación (S/N=10) de 0.020 g/100 g; con recuperaciones de adición del 84.7% al 95.6%, y desviación estándar relativa (RSD, n=6) de 1.6% a 5.8%. Basado en este método, se midieron los contenidos y se compararon las diferencias en 4 tipos de polvo de proteína de suero (polvo de suero desmineralizado D70 y D90, polvo concentrado de proteína de suero y polvo de α-lactoalbúmina) de 5 países. El método es sencillo, preciso y puede utilizarse para medir α-lactoalbúmina y β-lactoglobulina en materias primas de proteínas como el polvo de proteína de suero.

关键词

Cromatografía líquida ultrarrápida acoplada a espectrometría de masas en tándem con trípode de cuadrupolos;α-lactoalbúmina;β-lactoglobulina;polvo de proteína de suero

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