Determinación de formas de selenio en la orina humana mediante cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente

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摘要

Se utilizó el método de cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente (HPLC-ICP/MS) para determinar cinco formas de selenio en la orina humana: selenocisteína (SeCys2), metilselenocisteína (MeSeCys), selenito [Se(Ⅳ)], selenometionina (SeMet) y selenato [Se(Ⅵ)]. Después de diluir la muestra con agua ultrapura, se realizó la separación utilizando una columna cromatográfica Hamilton PRP-X100 (250 mm×4 mm, 10 μm), con una elución isocrática usando fosfato de diamonio 40 mmol/L (contiene 1% de metanol, pH 5) como fase móvil, lo que permitió separar las cinco formas de selenio en 13 minutos. El rango lineal para las cinco formas fue de 0 a 300.0 μg/L, con coeficientes de correlación (r) superiores a 0.999, y límites de detección de 0.2 a 0.5 μg/L. Excepto para la recuperación de adición de SeCys2 que fue de 37.7% a 70.4%, las recuperaciones de adición de MeSeCys, Se(Ⅳ), SeMet y Se(Ⅵ) fueron del 80.0% al 123%; las desviaciones estándar relativas (RSD) de las cinco formas no superaron el 7.8%. La aplicación de este método a muestras reales mostró que las formas de selenio en la orina humana están dominadas principalmente por SeCys2, con pequeñas cantidades de MeSeCys, SeMet, selenio inorgánico y compuestos selenizados desconocidos.

关键词

orina humana;formas de selenio;cromatografía líquida de alta resolución-ICP/MS

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