Estudio del método de análisis por cromatografía líquida - espectrometría de masas en tándem para tres vitaminas liposolubles en suero humano

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摘要

Como ejemplo de la detección de tres vitaminas liposolubles en suero humano, se discutió un método analítico para metabolitos endógenos humanos. Se utilizó cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) para detectar las vitaminas A, D3 y E en suero humano, estableciéndose curvas de calibración mediante la adición de estándares y estándares internos a una matriz de suero humano mezclado, con posterior sustracción del fondo endógeno, así como mediante la adición de estándares a una matriz simulada basada en albúmina sérica bovina (BSA). Los resultados indicaron que los límites de detección para las vitaminas A, D3 y E con el método basado en la matriz de suero humano mezclado fueron 4.2, 0.8 y 67.2 ng/mL, respectivamente, y los límites de cuantificación fueron 13.7, 2.6 y 221.9 ng/mL, respectivamente. Los coeficientes de correlación lineal para ambos métodos fueron mayores a 0.996; la recuperación en muestras reales a bajas y altas concentraciones añadidas fue de 90.7 % a 112 %, con desviación estándar relativa (RSD) de 1.0 % a 4.5 %, demostrando buena precisión y reproducibilidad. Los resultados del análisis de 40 muestras desconocidas mostraron que no hubo diferencias estadísticas entre ambos métodos. Por lo tanto, la aplicación del método de sustracción de fondo con matriz de suero humano mezclado para metabolitos endógenos humanos permite un análisis preciso de coincidencia de matriz entre los estándares y las muestras, facilitando el diagnóstico clínico de enfermedades relacionadas.

关键词

vitaminas liposolubles; cromatografía líquida - espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS); metabolitos endógenos; matriz de suero humano

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