Estudio en tiempo real de la liberación de ROS en células basado en microscopía electroquímica de barrido

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摘要

Este estudio utiliza la técnica de microscopía electroquímica de barrido (SECM) para examinar en tiempo real los cambios de especies reactivas de oxígeno (ROS) en células de cáncer de pulmón (A549) estimuladas con éster acético de forbol tetradecanoilo (PMA). Se utilizó peróxido de hidrógeno (H2O2) como objetivo detectable para obtener imágenes electroquímicas de la respuesta al estrés oxidativo celular. Usando cloruro de hexamina de rutenio (Ru(NH3)6Cl3) como medio del sistema, y la técnica de retroalimentación negativa de corriente, se obtuvieron imágenes claras de la morfología celular y se optimizó la distancia óptima de detección entre la sonda y el sustrato. Al establecer el potencial de la sonda en el potencial de reducción del peróxido de hidrógeno (-0.65 V), la imagen de corriente permitió observar la liberación en tiempo real de ROS, logrando la detección instantánea durante la estimulación con PMA en las células A549. La ampliación del área de exploración permitió obtener imágenes SECM de la liberación de ROS de diferentes células individuales, logrando una captura y reproducibilidad en tiempo real de la señal ROS. Los resultados muestran que PMA puede alterar el equilibrio dinámico de especies oxigenadas en las células, induciendo una respuesta de estrés oxidativo. Al colocar la sonda en el sitio de liberación de ROS celular y detectar los cambios de corriente a lo largo del tiempo, se observó fluctuación en la corriente, sugiriendo que la liberación extracelular de ROS es un proceso dinámico y pulsátil.

关键词

Microscopía electroquímica de barrido (SECM); Especies reactivas de oxígeno (ROS); H2O2; Células

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