Con el desarrollo de medicamentos anticuerpo como anticuerpos monoclonales y anticuerpos bispecíficos, la eliminación de agregados, proteínas de células huésped y subproductos estructuralmente similares en los procesos de purificación aguas abajo enfrenta mayores desafíos. Aunque la cromatografía de afinidad Protein A/G permite una captura altamente selectiva de anticuerpos, su capacidad para distinguir entre anticuerpos monoméricos, agregados y subproductos estructuralmente similares es limitada, requiriendo pasos de purificación ortogonales con selectividad específica. En los últimos años, la cromatografía de modo mixto de intercambio catiónico/interacción hidrofóbica (CEX/HIC) ha recibido atención debido a su capacidad para aprovechar sinérgicamente la interacción electrostática y la hidrofóbica en condiciones acuosas. Este artículo se centra en el diseño de la fase estacionaria CEX/HIC, revisa sus múltiples mecanismos de retención y el efecto de la matriz, la estructura porosa, el brazo espaciador, la composición del ligando y el modo de fijación sobre la adsorción, elución y selectividad de separación de proteínas. Combinando ejemplos de purificación de anticuerpos monoclonales y bispecíficos, resume su aplicación en la eliminación de agregados, proteínas de células huésped y subproductos estructuralmente similares. Este artículo puede servir como referencia para el diseño de medios y la optimización de procesos de purificación de anticuerpos.

cromatografía de modo mixto; intercambio catiónico; interacción hidrofóbica; diseño de ligandos; anticuerpos monoclonales; anticuerpos bispecíficos