Método de cromatografía líquida ultrarrápida acoplada a espectrometría de masas en tándem para la determinación de 13 mediadores lipídicos monohidroxilados en ratas normales y modelos de artritis reumatoide

JIN Bo ,  

CHEN Yi-yang ,  

LIANG Ya-jing ,  

HU Xue-xin ,  

MA Chen ,  

摘要

Este artículo establece un método de cromatografía líquida ultrarrápida acoplada a espectrometría de masas en tándem (UPLC-MS/MS) para determinar el contenido de 13 mediadores lipídicos monohidroxilados en tejidos del corazón, hígado, bazo, pulmones y riñones de ratas normales y modelos de artritis reumatoide, incluyendo 7 tipos de hidroxi-eicosatetraenoicos (HETE) y 6 tipos de hidroxi-docosahexaenoicos (HDHA). El método de preparación utiliza extracción líquido-líquido con acetato de etilo que contiene 2,6-di-terc-butil-4-metilfenol (BHT) como solvente de extracción. La validación metodológica mostró que los límites de detección (LOD) de los 13 analitos oscilan entre 0.1 y 1.0 ng/mL, y los límites de cuantificación (LOQ) entre 0.5 y 2.0 ng/mL. El rango lineal de los analitos exceptuando 4-HDHA fue de LOQ a 1000 ng/mL, con coeficientes de correlación superiores a 0.99. Las tasas de recuperación para los 13 analitos en tres niveles de adición fueron del 82.5% al 118%, con desviaciones estándar relativas (RSD) inferiores al 7.5%. La precisión intra-día fue menor al 5.0% y la precisión inter-día menor al 6.0%. Las soluciones de muestra fueron estables a temperatura ambiente durante 3 horas y a 4 °C durante 72 horas. El método es sensible, preciso y reproducible. Se aplicó para detectar los contenidos de los 13 mediadores lipídicos monohidroxilados en los tejidos de ratas normales y modelos de artritis reumatoide. Los resultados mostraron diferencias evidentes en la distribución de mediadores lipídicos monohidroxilados en diferentes órganos de ratas normales. En ratas con artritis reumatoide, la mayoría de los HETE y HDHA en tejidos cardíaco, hepático, pulmonar y renal mostraron una tendencia al aumento, sugiriendo que la artritis reumatoide puede causar cambios inflamatorios metabólicos en varios órganos.

关键词

Cromatografía líquida ultrarrápida - espectrometría de masas en tándem; mediadores lipídicos monohidroxilados; artritis reumatoide; hidroxi-eicosatetraenoicos; hidroxi-docosahexaenoicos

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