La imagen in situ y en tiempo real de microARN (miRNA) de baja abundancia en células vivas es crucial para revelar los mecanismos biológicos dinámicos de las enfermedades. Sin embargo, los sistemas tradicionales de sondas libres enfrentan limitaciones como la degradación por nucleasas intracelulares, baja eficiencia de colisión molecular e interferencias de fondo significativas. La estrategia de amplificación de señal basada en una plataforma de confinamiento nanométrico de ADN, mediante el anclaje preciso de componentes de amplificación isotérmica de ácidos nucleicos dentro de marcos tridimensionales como tetraedros de ADN, jaulas nanométricas de ADN, esferas de ADN o máquinas nanométricas de ADN, transforma las reacciones de difusión libre aleatoria en una amplificación en cascada local eficiente, proporcionando así una solución innovadora para superar estas limitaciones. Este trabajo revisa sistemáticamente los mecanismos centrales y los avances en la aplicación de esta plataforma: primero expone la base de la estabilidad biológica de las estructuras nanométricas de ADN, luego analiza la captación celular y las vías de entrega intracelular, y desde un punto de vista físico-mecánico descompone la esencia del aumento de la concentración local efectiva y la aceleración cinética de las reacciones en espacios confinados; sobre esta base, resume las estrategias de diseño basadas en tetraedros de ADN, jaulas nanométricas, redes de confinamiento múltiple y máquinas nanométricas, así como sus aplicaciones en la imagen miRNA en células vivas con alta sensibilidad y especificidad. Finalmente, el artículo discute los desafíos aún presentes en este campo y vislumbra tendencias de desarrollo en la fusión de múltiples tecnologías, con el fin de proporcionar una referencia para impulsar la traducción clínica de la plataforma de confinamiento nanométrico de ADN.

microRNA (miRNA); estructuras nanométricas de ADN; imagen celular viva; amplificación de ácidos nucleicos; efecto de confinamiento espacial