Estudio del sensor de dispersión dinámica de luz basado en la tecnología de amplificación por desplazamiento de cadena para la detección de aflatoxina M1

FAN Tao ,  

CUI Hao ,  

XIA Tao ,  

WU Bao-zhu ,  

LI Ting-ting ,  

摘要

Este estudio innovadormente construyó un sistema de detección de dispersión dinámica de luz (DLS) sencillo, de bajo costo y alta sensibilidad, combinado con la tecnología de amplificación de desplazamiento de cadena basada en endonucleasa (NESDA) para la detección de aflatoxina M1 (AFM1). En presencia de AFM1, la secuencia que contiene el aptámero de AFM1 hibrida parcialmente con el ADN cebador, lo que desencadena la reacción NESDA y produce una gran cantidad de ADN de cadena sencilla (ssDNA). El ADN de cadena sencilla generado hibrida con sondas de ADN unidas a nanopartículas de oro, lo que provoca la agregación de nanopartículas de oro y un aumento en su diámetro hidrodinámico promedio. Este cambio puede ser detectado mediante DLS para realizar análisis cuantitativos. Para mejorar el rendimiento de la detección, el sistema examinó el efecto de parámetros clave como la temperatura de reacción NESDA, tiempo de incubación, concentración de ADN plantilla, y la cantidad de polimerasa y endonucleasa añadidas sobre la señal de detección. Los resultados experimentales mostraron que bajo condiciones óptimas, el tamaño promedio de nanopartículas de oro tiene una buena relación lineal con la concentración de AFM1 en un rango de 8.3~1000 pmol/L, con un límite de detección tan bajo como 1.3 pmol/L. El método se aplicó con éxito para detectar AFM1 en muestras comerciales de leche, con tasas de recuperación añadidas del 94.3% al 107%, confirmando la capacidad de aplicación práctica confiable y un amplio potencial de uso futuro en la evaluación de seguridad alimentaria.

关键词

Aflatoxina M1; tecnología de amplificación por desplazamiento de cadena; tecnología de dispersión dinámica de luz; endonucleasa; nanopartículas de oro; leche

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