Este estudio propone una nueva estrategia de biosensor libre de células basada en la conversión del paradigma del portador de señales. Mediante la introducción del mutante de la ARN polimerasa T7 QMF-M6, capaz de utilizar eficientemente los dNTP para sintetizar ADN de cadena simple, en un sistema de regulación transcripcional centrado en un factor de transcripción alostérico (aTF), se logra la transición de un portador de señal de ARN a una molécula reportera de ADN estable, lo que mejora significativamente la robustez y la capacidad de resistencia a interferencias del sistema sensorial. Los resultados experimentales muestran que la plataforma presenta un rendimiento excelente para la detección de tetraciclina e iones de cobre, con límites de detección de 0,62 μmol/L y 26 nmol/L respectivamente, y una buena aplicabilidad en experimentos de recuperación de iones de cobre en muestras de agua ambiental. Este estudio propone una estrategia de salida de señal de ADN para resolver la inestabilidad del sistema reportero, proporcionando una vía técnica viable para desarrollar sistemas robustos de biosensores libres de células adecuados para monitoreo en campo y diagnóstico inmediato.

Biosensor libre de células;Factor de transcripción alostérico;ARN polimerasa T7;ADN