Sistema de biosensores sin células con salida de señal de ADN basado en mutantes de la ARN polimerasa T7

LAI Ru-hui ,  

SHU Liu ,  

HUANG Yan ,  

NIE Zhou ,  

LEI Chun-yang ,  

摘要

Este estudio propone una nueva estrategia de biosensores sin células basada en la conversión del paradigma del portador de señales. Al introducir el mutante de la ARN polimerasa T7 QMF-M6, capaz de utilizar eficientemente dNTP para sintetizar ADN monocatenario, en un sistema de regulación transcripcional centrado en el factor de transcripción alostérico (aTF), se logra la conversión del portador de señal de ARN a una molécula reporte de ADN estable, lo que mejora significativamente la robustez y la capacidad de resistir interferencias del sistema de detección. Los resultados experimentales muestran que la plataforma presenta un excelente rendimiento para la detección de tetraciclina y iones cobre, con límites de detección de 0.62 μmol/L y 26 nmol/L respectivamente, y una buena aplicabilidad en experimentos de recuperación de iones cobre en muestras de agua ambiental. Este estudio propone una estrategia de salida de señal de ADN para resolver la inestabilidad del sistema reporte, proporcionando una vía técnica viable para desarrollar sistemas de biosensores sin células robustos adecuados para monitoreo in situ y diagnóstico instantáneo.

关键词

Biosensores sin células;Factor de transcripción alostérico;ARN polimerasa T7;ADN

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