Estudio del método de análisis molecular del gen HRAS basado en la tecnología de electroforesis capilar de alta eficiencia

SHU Meng-long ,  

YU Yang ,  

LIU Chang ,  

FENG Liang-jie ,  

SUN Yu ,  

WANG Feng-chao ,  

CHEN Jin ,  

,  

摘要

Análisis preciso del estado de mutación de fragmentos del gen HRAS estrechamente relacionado con el cribado temprano y tratamiento de varios cánceres humanos. Este artículo, basado en un sistema de electroforesis capilar de alta eficiencia desarrollado en laboratorio, combinado con el método de análisis cuantitativo calibrado espacialmente (SDIS), después de verificar su fiabilidad, estabilidad y precisión, logró la detección y análisis sincronizados de los fragmentos de los codones 11 y 12 del gen HRAS. Los resultados muestran que con una concentración del medio de separación (HEC, 1300 K) del 1.0% y una intensidad de campo eléctrico de 100 V/cm, los dos fragmentos genéticos pueden separarse bien dentro de 6 minutos con una buena línea base, y que la desviación estándar relativa detectada por el sistema no supera el 2.5%. Las concentraciones detectadas de los dos fragmentos presentan una buena relación lineal (coeficiente de correlación (r²) superior a 0.95), los límites de detección (LOD) son 0.059 ng/μL y 0.061 ng/μL respectivamente. En comparación con la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa tradicional (qPCR) y la tecnología de secuenciación, el sistema propio tiene ventajas significativas en costos, tiempo de análisis y portabilidad del equipo, y mediante la integración del método SDIS se logra un análisis dirigido de alta sensibilidad de los fragmentos del gen HRAS.

关键词

Electroforesis capilar de alta eficiencia; gen HRAS; método SDIS; detección de mutaciones genéticas

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