Mediante la detección de los conjugados HN-ADN formados tras la exposición de animales al aziridino (HN), se realiza un análisis confirmatorio del origen de la exposición a HN. Ratas Sprague-Dawley (SD) de 6 semanas de edad y aproximadamente 200 g de peso fueron inyectadas por vía intraperitoneal con soluciones de aziridino 1 (HN1), aziridino 2 (HN2) y aziridino 3 (HN3) para construir un modelo de exposición al agente tóxico, configurando grupos de exposición a aziridino (0,3 LD₅₀, 0,5 LD₅₀ y LD₅₀) y un grupo control con solvente en blanco. Se utilizó cromatografía líquida de alta eficiencia acoplada a espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS) en modo monitoreo de reacción múltiple (MRM) para analizar cuantitativamente los tipos y cantidades de conjugados HN-ADN en la orina de las ratas. Los resultados mostraron una buena relación lineal para 12 estándares de conjugados HN-ADN en el rango de 0.02~500 ng/mL, límite de detección (LOD) de 0.01~0.02 ng/mL, límite de cuantificación (LOQ) de 0.02~0.05 ng/mL y desviación estándar relativa (RSD) dentro y entre lotes inferior al 15%. A las 12 horas de la exposición, se detectaron en la orina de las ratas los conjugados HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 y HN-Bis-GN7, con contenidos en orden HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6. Las concentraciones de los cuatro conjugados se correlacionan positivamente con la dosis de exposición y disminuyen gradualmente con el tiempo. La aplicación de HPLC-MS/MS para detectar los conjugados de ADN en la orina de animales expuestos a HN permite una detección temprana no invasiva, trazabilidad precisa y evaluación del daño, proporcionando una base para estudiar los procesos y mecanismos de reparación del daño al ADN inducido por HN.

Aziridino;Conjugados de ADN;Biomarcadores;Análisis de trazabilidad;Cromatografía líquida de alta eficiencia-espectrometría de masas en tándem