Determinación cuantitativa de aductos de ADN libre en orina revela daños y características de tres exposiciones a mostaza nitrogenada

LIU Xiao-hui ,  

LIU Yu-long ,  

WANG Zhao-xia ,  

WANG Yong ,  

CHEN Jia ,  

XUE Jin-juan ,  

LIU Yan-qin ,  

CHEN Ai-bing ,  

XU Hua ,  

XIE Jian-wei ,  

摘要

Se realizó un análisis de confirmación del origen de la exposición a HN mediante la detección de aductos HN-ADN formados tras la exposición de animales a mostaza nitrogenada (HN). Se establecieron modelos de exposición a toxinas mediante la inyección intraperitoneal en ratas Sprague-Dawley (SD) de 6 semanas y aproximadamente 200 g, con soluciones de mostaza nitrogenada 1 (HN1), mostaza nitrogenada 2 (HN2) y mostaza nitrogenada 3 (HN3), configurando grupos de exposición a HN (0.3 LD50, 0.5 LD50 y LD50) y un grupo control con solvente en blanco. Se utilizó cromatografía líquida de alta eficiencia-espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS) en modo de monitoreo de reacción múltiple (MRM) para cuantificar los tipos y contenidos de aductos HN-ADN en la orina de las ratas. Los resultados mostraron que los 12 estándares de aductos HN-ADN presentaron una buena linealidad en el rango de 0.02~500 ng/mL, con límites de detección (LOD) de 0.01~0.02 ng/mL y límites de cuantificación (LOQ) de 0.02~0.05 ng/mL; la desviación estándar relativa (RSD) intracorrida e intercorrida fue menor al 15%. Doce horas después de la exposición, se detectaron aductos HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 y HN-Bis-GN7 en la orina de las ratas, con contenidos en el orden HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6. Las concentraciones de los cuatro aductos estaban positivamente correlacionadas con la dosis de exposición y disminuyeron gradualmente con el tiempo. La aplicación de HPLC-MS/MS para detectar aductos de ADN en la orina animal tras la exposición a HN permitió una detección temprana no invasiva, una trazabilidad precisa y una evaluación del daño, proporcionando una base para estudiar los procesos y mecanismos de reparación del daño en el ADN inducidos por HN.

关键词

mostaza nitrogenada;aductos de ADN;biomarcadores;análisis de trazabilidad;cromatografía líquida de alta eficiencia-espectrometría de masas en tándem

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