Este estudio se basa en cubos de plata nanométricos (Ag NCs) y la estrategia de corte trans CRISPR/Cas13a para construir un sensor SERS sobre papel hidrofóbico destinado a detectar miR-943 en el suero de pacientes con infarto cerebral (CI). Los Ag NCs se ensamblaron sobre papel hidrofóbico para construir preliminarmente un sustrato SERS, y el ADN monocatenario (ssDNA) modificado con moléculas señal Cy5 se fijó a la base SERS del papel hidrofóbico mediante el enlace Ag—S, formando un sensor SERS sobre papel hidrofóbico. Cuando está presente el objetivo miR-943, se activa específicamente la capacidad de corte trans de CRISPR/Cas13a, que corta de forma inespecífica el ssDNA, alejando a Cy5 de la superficie de la base SERS del papel hidrofóbico, lo que reduce la intensidad del pico característico SERS de Cy5 a 1468 cm-1. Este sensor presenta una buena relación lineal en el rango de 10 amol/L a 10 pmol/L, con un coeficiente de correlación r2=0,986, un límite de detección (LOD) tan bajo como 1,55×10-17 mol/L y una excelente especificidad y reproducibilidad. Los resultados de las muestras clínicas son básicamente consistentes con la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real cuantitativa (qRT-PCR). Este método ofrece una solución fiable y prometedora para el diagnóstico temprano y no invasivo del infarto cerebral.
关键词
dispersión Raman amplificada superficial;infarto cerebral;CRISPR/Cas13a;miARN;suero;nanocubos de plata (Ag NCs)