Este estudio se basa en nanocubos de plata (Ag NCs) y la estrategia de corte trans CRISPR/Cas13a para construir un sensor SERS en papel hidrofóbico para detectar miR-943 en el suero de pacientes con infarto cerebral (CI). Los Ag NCs se ensamblaron sobre papel hidrofóbico para construir inicialmente el sustrato SERS, y el ADN de cadena simple (ssDNA) modificado con la molécula señal Cy5 se fijó en el sustrato SERS de papel hidrofóbico mediante el enlace Ag—S, formando así un sensor SERS en papel hidrofóbico. Cuando está presente el objetivo miR-943, se activa específicamente la capacidad de corte trans de CRISPR/Cas13a, que corta inespecíficamente el ssDNA y aleja Cy5 de la superficie del sustrato SERS de papel hidrofóbico, lo que provoca una disminución en la intensidad del pico característico de Cy5 a 1468 cm^-1. Este sensor muestra una buena relación lineal en el rango de 10 amol/L a 10 pmol/L, con un coeficiente de correlación r^2=0.986, un límite de detección (LOD) tan bajo como 1.55×10^-17 mol/L y cuenta con una excelente especificidad y reproducibilidad. Los resultados de las muestras clínicas son básicamente consistentes con la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR). Este método ofrece una solución confiable y prometedora para el diagnóstico temprano y no invasivo del infarto cerebral.
关键词
dispersión Raman amplificada en superficie;infarto cerebral;CRISPR/Cas13a;miARN;suero;nanocubos de plata (Ag NCs)