Este estudio estableció un método combinado de cromatografía líquida ultrarrápida y espectrometría de masas de alta resolución (UPLC-HRMS) para la detección de 26 ácidos biliares en suero. Tras el pretratamiento de precipitación de proteínas en las muestras de suero, se utilizó una columna cromatográfica Phenomenex Kinetex C₁₈ (2,1 mm × 100 mm, 2,6 μm) para la separación, con un eluyente en gradiente de solución acuosa de acetato de amonio a 5 mmol/L y metanol como fase móvil. Los datos se recopilaron en modo de iones negativos por electroaspersión, con cuantificación mediante método de estándar externo. La validación metodológica mostró una buena linealidad para los 26 ácidos biliares en el rango de 0.04 a 1163.5 ng/mL, con coeficientes de correlación (r²) no inferiores a 0.9990. Los límites de detección fueron de 0.01 a 0.86 ng/mL, y los límites de cuantificación de 0.04 a 2.22 μg/mL, con recuperaciones entre 68.1% y 99.8%, y desviaciones estándar relativas entre 0.10% y 10%. Este método es adecuado para la detección precisa del contenido de ácidos biliares en muestras de suero de diferentes orígenes y puede proveer un soporte metodológico fiable para el estudio del metabolismo de ácidos biliares y la selección de biomarcadores relacionados con enfermedades.

suero; ácidos biliares; UPLC-HRMS; análisis cuantitativo