Utilizando la técnica de cromatografía líquida ultraeficiente acoplada a espectrometría de masas de alta resolución (UPLC-HRMS), se realizó la identificación estructural in vitro de los conjugados peptídicos de albúmina y nitrógeno en modo de escaneo completo y escaneo secundario dependiente de datos (Full MS/dd-MS²) para ampliar la biblioteca de biomarcadores disponibles para la identificación del origen de la exposición al nitrógeno. Los resultados muestran que los tres tipos de nitrógeno pueden unirse a seis fragmentos peptídicos de albúmina, con sitios de adición que incluyen cisteína (Cys³⁴) con un grupo tiol libre único, leucina (Leu³²⁷), metionina (Met³²⁹) y glutamato (Glu²³⁰). Los siete péptidos conjugados formados pueden servir como biomarcadores potenciales para el nitrógeno, de los cuales los di- y tripéptidos se han confirmado como indicadores definitivos de exposición. Se resumieron los iones característicos y los patrones de fragmentación de los aductos generados por la incubación in vitro de los tres tipos de nitrógeno con seis fragmentos peptídicos, se proporcionaron y optimizaron pares de iones para la detección mediante espectrometría de masas, estableciendo así una base para el desarrollo de métodos cuantitativos de LC-MS/MS basados en el modo de monitoreo de reacciones múltiples, y proporcionando soporte técnico para la confirmación de la exposición al nitrógeno en muestras complejas.

nitrógeno; albúmina; aductos; patrones de fragmentación; UPLC-HRMS