Debido a las limitaciones de seguridad y éticas asociadas con las muestras biomédicas en el rastreo de la exposición ambiental a agentes neurotóxicos organofosforados (OPNAs), este estudio logró realizar un análisis del rastreo ambiental mediante la identificación de aductos de tirosina formados entre la ribulosa-1,5-bisfosfato carboxilasa oxigenasa (RuBisCO) abundante en plantas y los OPNAs. Se seleccionaron Arabidopsis y arroz (Nipponbare) como principales objetos de estudio. Tras la exposición a VX, GA y GD, se realizó un análisis usando cromatografía líquida de alta eficacia-espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS), identificándose exitosamente los aductos de tirosina formados entre la proteína RuBisCO con VX, GA y GD. Se optimizaron las condiciones para la hidrólisis enzimática, la extracción en fase sólida y el método de purificación de la proteína RuBisCO (método de precipitación con sulfato de protamina de pescado (PSP)). En Arabidopsis, las dosis mínimas detectables de exposición a VX, GA y GD fueron 7,4 μg/planta, 9,3 μg/planta y 91 ng/planta respectivamente. En arroz, la dosis mínima detectable para VX fue 74 ng/planta, siendo los resultados para GA y GD consistentes con Arabidopsis. La concentración de aductos se correlacionó positivamente con la dosis de exposición y permaneció estable hasta por 6 meses en plantas liofilizadas. Este estudio demuestra por primera vez la presencia de aductos de tirosina derivados de la proteína RuBisCO, validando su uso como biomarcadores para el rastreo de la exposición ambiental a OPNAs. Dado que la proteína RuBisCO es la proteína comestible más abundante en las plantas, esta investigación también ofrece un nuevo enfoque para analizar la contaminación residual de plaguicidas organofosforados en alimentos verdes.
关键词
RuBisCO;aductos de tirosina;agentes neurotóxicos organofosforados;rastreo;cromatografía líquida de alta eficacia-espectrometría de masas en tándem