Método de detección de amplificación de polimerasa recombinante visual basado en un interruptor óptico de molécula de ácido nucleico

DENG Fan ,  

SUN Na-na ,  

ZHOU Kai-yue ,  

LIU Jiang-hua ,  

LI Guo-liang ,  

XU Qin-feng ,  

FENG Xia ,  

摘要

Este estudio utiliza la molécula de ácido nucleico "interruptor óptico" [Ru(bpy)2(dppz)]2+ como tinte fluorescente aplicado a la amplificación RPA fluorescente en tiempo real, logrando una detección de amplificación fluorescente simple y multiplex de patógenos transmitidos por alimentos (como Staphylococcus aureus (S.aur) y Salmonella (S.spp)). Además, se estableció un método rápido de detección RPA visual basado en [Ru(bpy)2(dppz)]2+, que determina el resultado de la amplificación mediante la observación directa de una fuerte señal fluorescente roja bajo luz visible tras la unión del ADN amplificado con [Ru(bpy)2(dppz)]2+, evitando la inhibición evidente de la reacción de amplificación causada por altas concentraciones de [Ru(bpy)2(dppz)]2+. Tiene buenos efectos de detección visual, alta especificidad y alta sensibilidad, y se espera que se aplique ampliamente en el monitoreo ambiental, la seguridad alimentaria y el diagnóstico clínico rápido en el lugar de ácidos nucleicos.

关键词

amplificación de polimerasa recombinante (RPA); [Ru(bpy)2(dppz)]2+; detección visual; Staphylococcus aureus

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