Método de cromatografía líquida de alta eficacia con detector diferencial de índice de refracción para la determinación del contenido de agentes protectores y nutrientes en crioprotectores vitrificados

FENG Xia-lan ,  

ZHAO Xin-qing ,  

PU Xiao-cong ,  

TANG Min ,  

ZHANG Rong-qin ,  

摘要

Se estableció un método de cromatografía líquida de alta eficacia con detector de índice de refracción diferencial (HPLC-RID) para la determinación simultánea del contenido de 4 agentes protectores y 2 nutrientes en crioprotectores vitrificados. Se utilizó solución de ácido sulfúrico 0.01 mol/L como fase móvil para la elución, separación mediante columna cromatográfica BIO-RAD Aminex HPX-87H (300 mm×7.8 mm, 9 μm), detección con detector diferencial de índice de refracción (RID) y cuantificación por método de estándar externo. Los resultados mostraron que bajo condiciones cromatográficas optimizadas, los 6 componentes a determinar se separan eficazmente, con buena linealidad en el rango de concentración evaluado, coeficiente de correlación (r) no menor a 0.9999, límites de detección (LOD) y cuantificación (LOQ) de 0.009~0.025 mg/mL y 0.030~0.085 mg/mL, respectivamente. La recuperación promedio de muestras negativas a concentraciones bajas, medias y altas fue de 99.8%~103%, con desviación estándar relativa (RSD, n=3) de 0.20%~1.8%. El método es sencillo, específico y preciso, adecuado para la medición del contenido de agentes protectores y nutrientes en crioprotectores vitrificados.

关键词

cromatografía líquida de alta eficacia con detector diferencial de índice de refracción; crioprotectores vitrificados; congelación de embriones; agentes protectores; nutrientes

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