Determinación de 37 aminoácidos en suero mediante cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem

ZHAO Yun-xia ,  

LI Zi-ying ,  

CHEN Xin ,  

ZHANG Yu-xin ,  

XIAO Wei-min ,  

LIU Ai-ping ,  

LI Mei-fang ,  

JIN Yi-bao ,  

DU Qing-ping ,  

WANG Qi ,  

SU Jia-ting ,  

YANG Guo-wu ,  

FANG Wen ,  

摘要

Se estableció un método cuantitativo basado en cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) para analizar 37 aminoácidos en suero. Después de precipitar proteínas con una solución acuosa al 10 % de ácido sulfosalicílico, la separación se realizó usando una columna cromatográfica Phenomenex Kinetex F5 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm), con una fase móvil en gradiente de solución acuosa al 0.02 % de ácido fórmico y acetonitrilo. La detección se llevó a cabo en modo de ionización por electrospray (ESI) positivo y monitoreo de reacciones múltiples (MRM). El método fue validado metodológicamente; los resultados mostraron buena linealidad para los 37 aminoácidos en rangos desde el límite de detección hasta 1000 ng/mL, con coeficientes de correlación superiores a 0.999, tiempos de retención entre 4.60 y 9.16 min, límites de detección de 0.2 a 10.0 ng/mL y límites de cuantificación de 0.5 a 20.0 ng/mL. El promedio de recuperación para diferentes concentraciones añadidas fue del 83.2 % al 118 %, con desviaciones estándar relativas del 0.90 % al 9.4 %. Se aplicó el método a 49 muestras de suero; no se detectaron carnosina ni cisteína, la tasa de detección de homocisteína fue del 10.20 %, y la de los otros 34 aminoácidos fue superior al 90 %. El método es altamente preciso, sensible y específico, y puede utilizarse para la determinación del contenido de aminoácidos en muestras de suero, proporcionando datos más completos para enfermedades relacionadas con trastornos del metabolismo de aminoácidos.

关键词

cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem;aminoácidos;suero;ácido sulfosalicílico

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