Estudio del método de análisis en línea de electroforesis en gel de proteínas

FAN Shuai-qiang ,  

YOU Qing-xiang ,  

ZENG-yuan ,  

YANG Bo ,  

MA Ming-yuan ,  

ZHANG Da-wei ,  

LI Zhen-qing ,  

摘要

Basado en un analizador de electroforesis de proteínas desarrollado en laboratorio, este artículo propone un método que permite la separación de moléculas de proteínas mediante SDS-PAGE, así como el análisis en línea del peso molecular y la concentración. Mediante la electroforesis de un marcador de proteínas de 10.5~107 kDa y la captura en línea de imágenes de electroforesis en gel, se analizó la relación entre el valor de gris y la concentración de moléculas de proteína. Los resultados muestran que el dispositivo puede realizar una separación rápida de muestras de proteínas menores a 107 kDa en 30 minutos; cuando se irradió con luz ultravioleta durante 5 minutos, la intensidad de fluorescencia de las bandas de proteína alcanzó su punto máximo; en el rango de 10.5~107 kDa, la distancia de migración es proporcional al peso molecular, con un coeficiente de correlación de hasta 0.93; para moléculas proteicas mayores a 20.1 kDa, la intensidad de fluorescencia tiene una relación lineal con la concentración de masa en el rango de 0.72~3.96 μg/μL, con coeficientes de correlación superiores a 0.988; se analizaron los componentes proteicos en lágrimas con el analizador desarrollado y se separaron con éxito la inmunoglobulina A, lactoferrina, proteínas séricas, lipoproteínas y lisozima. Este estudio tiene un valor de aplicación importante para el desarrollo de dispositivos de detección rápida de moléculas proteicas. En comparación con los métodos tradicionales de electroforesis en gel de proteínas, el analizador desarrollado reduce el tiempo de electroforesis de proteínas de más de 1.5 horas a menos de 30 minutos. Este estudio tiene un valor de aplicación importante para el desarrollo de dispositivos de detección rápida de moléculas proteicas.

关键词

proteína; electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio; colorante fluorescente; lágrimas

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