La detección rápida de adenosina en la orina es de gran importancia para el cribado de enfermedades como tumores, mientras que los métodos existentes presentan deficiencias como operación compleja y baja sensibilidad. Este estudio propone un sensor de aptámero de ácido nucleico marcado en tándem con tetrámero G para la detección rápida y sensible de adenosina en la orina. Primero, se modifica covalentemente una cadena doble de ácido nucleico que contiene el aptámero de adenosina en la superficie de un electrodo de carbono vítreo limpio. Cuando existe adenosina, se une específicamente al aptámero (Apt), exponiendo la sonda iniciadora de amplificación por reacción en cadena rodante (Primer, P). Luego, P sirve como molde para la amplificación por RCA, generando en poco tiempo una gran cantidad de productos de amplificación ricos en secuencias repetidas de bases G. Estas secuencias repetidas se ensamblan automáticamente para formar estructuras de tetrámero G (G4) en presencia de iones de potasio, facilitando la fijación de gran cantidad de azul de metileno (MB) para mejorar la corriente de respuesta y aumentar la sensibilidad de detección. Se caracterizó el proceso de construcción del sensor mediante electroforesis, voltamperometría cíclica y espectroscopía de impedancia electroquímica, y se optimizaron las condiciones de detección de adenosina. Bajo condiciones experimentales óptimas, el rango lineal de detección del sensor es de 1 fmol/L a 1 nmol/L, con un límite de detección de 0.68 fmol/L. El sensor también muestra buena estabilidad (RSD=5.4%), reproducibilidad (RSD=4.1%) y selectividad. La recuperación de adenosina en muestras frescas de orina es del 104% al 105%, con un RSD de 1.5% a 5.5%. Este biosensor basado en aptámer es fácil de operar, sensible, específico y de bajo costo, con potencial para la detección rápida de adenosina en la orina humana.

adenosina;aptámero;amplificación por reacción en cadena rodante;tetrámero G;sensor electroquímico