El artículo utiliza microesferas de poliacrilato de poro grande como matriz y monómero funcional metacrilato de glicidilo metilo-ácido diaminodisetano (GMA-IDA) como ligando. Mediante una reacción redox, se preparó un medio de cromatografía de afinidad metálica. Primero, mediante la reacción del grupo epoxi de GMA y el grupo imino de IDA, se preparó el monómero funcional GMA-IDA, posteriormente, mediante una reacción redox, los dobles enlaces del monómero funcional se sometieron a polimerización por injerto para preparar microesferas poliméricas de poro grande. Finalmente, en una solución de níquel 0,1 mol/L, se queló Ni²⁺, preparando el medio de cromatografía de afinidad FastSep-GMA-IDA-Ni. Se investigó el efecto de los factores en la reacción de polimerización por injerto sobre la capacidad de adsorción de proteínas, incluyendo la concentración del monómero funcional, la concentración del iniciador, el pH del sistema, la temperatura y el tiempo de reacción, determinando las mejores condiciones para preparar el medio FastSep-GMA-IDA-Ni. Usando hemoglobina bovina como proteína modelo, la capacidad estática de enlace del medio FastSep-GMA-IDA-Ni alcanzó un máximo de 47,97 mg/mL, aproximadamente un 25,75% más alta que el medio comercial de afinidad Ni. El medio FastSep-IDA-Ni preparado por el método de acoplamiento tenía una capacidad estática de enlace de 12,518 mg/mL, mucho menor que el FastSep-GMA-IDA-Ni preparado por el método de injerto. Además, FastSep-GMA-IDA-Ni mostró mejor eficiencia en la transferencia de proteínas que el medio comercial. Se observó que con el aumento de contenido de níquel, la capacidad estática de enlace de proteínas del medio FastSep-GMA-IDA-Ni preparado bajo las mismas condiciones aumentaba hasta alcanzar la saturación. Los resultados mostraron que con el aumento de la capacidad de intercambio iónico, el contenido de níquel quelado también aumentó, alcanzando un contenido máximo de níquel de 104,06 μmol/mL. El FastSep-GMA-IDA-Ni preparado se usó para separar y purificar la proteína hemaglutinina (HA-His) expresada por células CHO, logrando buenos resultados de separación.

Medio cromatográfico de afinidad metálica; injerto; microesferas poliméricas; capacidad de unión de proteínas; separación y purificación