Edwardsiella tarda lenta (Edwardsiella tarda) es una bacteria patógena importante en la acuicultura. Los métodos rápidos, eficientes y adecuados para la detección in situ pueden prevenir y controlar eficazmente la aparición de enfermedades. Este artículo combina la amplificación por anillo rodante (RCA) con la técnica de tiras de cromatografía (LFS), utilizando microesferas de látex como marcadores, estableciendo un nuevo método de detección RCA-LFS para Edwardsiella tarda. Según el gen gyrb de esta bacteria, se diseñaron sondas bloqueadas y cebadores correspondientes para la amplificación. Las condiciones optimizadas para la RCA son: concentración de la sonda bloqueada de 500 pmol/L, temperatura de amplificación de 61 ℃ y tiempo de amplificación de 50 minutos. Después de la amplificación, la tira de cromatografía se inserta directamente en la solución del producto de amplificación, y los resultados se leen a simple vista. Este método tiene alta especificidad, no tiene reacciones cruzadas con otros patógenos comunes, y el límite de detección del ADN genómico de Edwardsiella tarda es de 50 ng/mL. En comparación con los marcadores de oro coloidal comunes, las microesferas de látex son estables y tienen una variedad de colores, y se espera que permitan la detección simultánea de múltiples bacterias solo por el cambio de color. Se utilizó el método RCA-LFS para detectar muestras de anguila japonesa infectadas, los resultados coinciden con el gel de electroforesis convencional, pero el método es más simple, rápido y más fácil para la interpretación de resultados. RCA-LFS tiene un papel destacado en la detección in situ de patógenos.

amplificación por anillo rodante;Edwardsiella tarda lenta;sonda bloqueada;microesferas de látex;tirás de cromatografía