Se estableció un método inmunofluorescente de flujo cuantitativo para detectar el contenido de ácido penicilico (BA). Primero, mediante la síntesis del antígeno completo BA-BSA, se obtuvieron anticuerpos monoclonales anti-BA con alta afinidad mediante inmunización. Luego, el antígeno sintetizado BA-BSA se marcó con ficobiliproteína y compitió con el BA en la muestra por unirse a anticuerpos monoclonales anti-BA conjugados con microesferas fluorescentes. La cuantificación de BA en la muestra se logró adoptando un inmunoensayo de flujo para detectar la intensidad media de fluorescencia en la superficie de las microesferas. El rango lineal de BA fue de 1,01 a 97,96 μg/L, la concentración de inhibición media (IC50) fue de 9,92 μg/L, el coeficiente de correlación (r2) fue 0,9998, y el límite de detección fue de 0,56 μg/kg. La tasa de recuperación agregada fue del 90,4 % al 104 %, con una desviación estándar relativa del 5,0 % al 9,8 %. El método mostró buena especificidad, con reacciones cruzadas inferiores al 0,1 % con ocratoxina A, aflatoxina B1, aflatoxina M1, fumonisina B1 y fumonisina B2. Los resultados de las muestras reales coinciden con los obtenidos mediante cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas en tándem. El método inmunofluorescente de flujo establecido es simple, rápido, sensible y preciso, y puede aplicarse para analizar y detectar otras micotoxinas en diversas matrices alimentarias complejas.
关键词
Método inmunofluorescente de flujo; Ácido penicilico; Antígeno; Anticuerpo; Seguridad alimentaria