Este artículo establece un método eficiente y confiable para la determinación de 9 ácidos biliares en manchas de sangre seca mediante derivatización antes de la columna - cromatografía líquida de alta eficiencia - espectrometría de masas triple cuadrupolo. Las muestras se extrajeron con metanol mediante agitación en vórtice, se derivaron con solución de 2-hidrazinopiridina en acetonitrilo y luego se secaron con aire; se redisolvieron en una solución acuosa al 50% de metanol, se filtraron mediante membrana orgánica de 0,22 µm y se analizaron cuantitativamente mediante método de estándar interno. Se seleccionó la columna T3 para la cromatografía, con fase móvil agua (0,1% ácido fórmico) - metanol-acetonitrilo (9:1, relación volumétrica) para elucución en gradiente, usando modo de iones positivos y modo de monitoreo de reacción múltiple para la detección. Los resultados muestran: las curvas estándar para los 9 compuestos objetivo tienen buena linealidad (r² de 0,9982 a 0,9998), límite de detección (LOD) de 0,2~2,0 nmol/L, límite de cuantificación (LOQ) de 1,0~10 nmol/L, recuperación de 92.4%~109%, desviación estándar relativa (RSD) menor al 15%, RSD intra y entre lotes menor al 12%, efecto matricial relativo del 89.6%~109% (RSD ≤ 11%), los derivados estables a 4 ℃ durante 48 h. Comparado con resultados de muestras de suero, muestra alta correlación y consistencia. El método ofrece buena selectividad y linealidad, sin efecto matriz ni efecto de arrastre evidente, buena estabilidad de los compuestos objetivo, y puede usarse para detección rápida de ácidos biliares en manchas de sangre seca.

ácidos biliares; manchas de sangre seca; cromatografía líquida-espectrometría de masas; derivatización