Método de superficie de respuesta combinado con cromatografía líquida de alta eficiencia-espectrometría de masas en tándem para la determinación de 20 drogas comunes en manchas de sangre seca
Se estableció un método de cromatografía líquida de alta eficiencia-espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS) para la detección de 20 drogas en manchas de sangre seca (DBS). Usando el área relativa del pico como indicador, se determinaron el tiempo de secado, la temperatura de secado y el rango del solvente de extracción para las muestras de DBS mediante un método de un solo factor; mediante un método de superficie de respuesta se optimizaron las condiciones de preparación y extracción de las DBS, siendo las condiciones óptimas secar las DBS a 50 ℃ durante 20 min, y extraer con metanol-acetonitrilo (13:20, relación volumétrica); se realizó la separación usando una columna cromatográfica Phenomenex Kinetex F5 (100 mm×2.1 mm, 2.6 μm), con fase móvil de agua con ácido fórmico al 0.1%-acetonitrilo en gradiente, y análisis mediante HPLC-MS/MS. Los resultados mostraron una buena linealidad para las 20 sustancias objetivo en DBS en el rango 0.5~100 ng/mL, con coeficiente de correlación mayor a 0.99, límites de detección entre 0.1 y 1 ng/mL, límites de cuantificación de 0.5~5 ng/mL; las recuperaciones de extracción en niveles bajo, medio y alto fueron de 81.1% a 124%, el efecto matriz de 84.6% a 116%, con desviaciones estándar relativas menores al 15%; la precisión dentro del día fue de 0.18% a 9.8%, y entre días de 0.26% a 9.9%. Este método es simple, rápido, sensible, los objetivos son estables en DBS, facilita el almacenamiento y transporte, y satisface la necesidad de cribado rápido de múltiples drogas en DBS para el control de drogas.
关键词
manchas de sangre seca;drogas;cromatografía líquida de alta eficiencia-espectrometría de masas en tándem;método de superficie de respuesta