El método de análisis de concentración sin calibración (CFCA) basado en la tecnología de resonancia de plasmones superficiales (SPR) puede medir la concentración activa de proteínas sin necesidad de ningún estándar, utilizando únicamente coeficientes de difusión de proteínas conocidos y midiendo la concentración activa bajo condiciones de difusión limitada. Este estudio propone un método CFCA en forma de captura (CCFCA) para medir la concentración activa de la proteína CYFRA21-1. Los resultados muestran que los valores medidos por el método CCFCA son 0.67 mg/mL con una precisión diurna del 4.6%, mientras que los valores medidos por el método CFCA son 0.7 mg/mL con una precisión diurna del 6.5%. Además, el nivel de acoplamiento de anticuerpos ha sido un factor clave que limita el uso de CFCA; si los métodos de almacenamiento o activación del chip no son adecuados, el nivel de acoplamiento de anticuerpos en la superficie del chip no alcanzará el requisito para superar las limitaciones de transferencia de masa requeridas por el método CFCA (requisitos metodológicos QC_ratio>0.2), lo que hace que los resultados no sean confiables. Debido a que el método de captura puede orientar espacialmente los anticuerpos de manera más adecuada con la ayuda de la proteína G , permite que los resultados de detección de CCFCA sean precisos y estables incluso a niveles bajos de acoplamiento. En comparación con el método clásico CFCA, los resultados de CCFCA son confiables y un solo chip puede usarse para múltiples detecciones de anticuerpo-analito a través de la regeneración, siendo una mejor opción para futuras mediciones de concentración activa de proteínas.

Cuantificación sin calibración;CYFRA21-1;Concentración de proteína activa;Método de captura