Se estableció un método de derivatización previa a la columna/cromatografía líquida de alta resolución con detección por fluorescencia para 13 tipos de disacáridos de heparán sulfato acetilado (HS) en ratones con tumores de células de cáncer de páncreas PANC-1 y CFPAC-1. Las muestras de tumor de cáncer de páncreas fueron sometidas a un tratamiento previo que incluyó desgrasado y proteólisis para obtener disacáridos HS, que luego reaccionaron con el reactivo de derivatización 2-aminoacridona (AMAC). La separación se realizó en una columna Thermo Scientific HYRERSIL ODS-2C18 con una elución en gradiente de metanol/acetato de amonio 60 mmol/L (pH 5.6), detectándose a longitudes de onda de excitación de 425 nm y emisión de 520 nm. Los resultados mostraron una buena linealidad para los 13 disacáridos HS en sus rangos de concentración respectivos (r2≥0.9990), con límites de detección (LOD) entre 0.012 y 0.313 µg/mL y límites de cuantificación (LOQ) entre 0.117 y 1.250 µg/mL. La precisión expresada como desviación estándar relativa (RSD) varió de 0.040% a 0.63%, la estabilidad intradía tenía un RSD de 0.34% a 3.6%, la estabilidad interdía un RSD de 1.8% a 6.4%, recuperación por adición del 80.7% al 109% con RSD de 0.50% a 17%. Se detectaron 9 tipos de disacáridos HS en tejidos tumorales de ratones con tumores de dos tipos de células de cáncer de páncreas, donde ΔUA-GlcN (ⅣH) fue la mayor proporción, con 28627.558 nmol/g y 66938.786 nmol/g, seguido por ΔUA-GlcNAc (ⅣA) y ΔUA-GlcN, 6S (ⅡH). Resultados de acoplamiento molecular mostraron que ⅣH tiene la unión más fuerte con el factor de crecimiento epidérmico unido a heparina (HB-EGF), y ⅡH con el factor de crecimiento de fibroblastos-2 (FGF-2). Las características de la secuencia de sulfatación de HS y sus interacciones con HB-EGF y FGF-2 regulan el proceso de desarrollo del cáncer de páncreas. Los resultados pueden ayudar en el tratamiento y diagnóstico temprano del cáncer de páncreas.

Cáncer de páncreas; Heparán sulfato acetilado; Cromatografía líquida de alta resolución con detección por fluorescencia; Derivatización previa a la columna