Жидкостно-жидкостной фазовый разрыв (LLPS) как фундаментальный механизм образования биомолекулярных конденсатов, его микрофизические характеристики и количественная характеристика материальных свойств являются ключом к пониманию функций и регуляции конденсатов. В статье систематически рассматриваются различные технические методы анализа микроформ и физических свойств LLPS. В части характеристик размера и структуры динамическое светорассеяние и малая угловая рассеяние позволяют in situ контролировать нуклеацию, рост и внутреннюю упорядоченность конденсатов; криоэлектронная микроскопия и атомно-силовая микроскопия обеспечивают сверхструктурные и наномеханические данные с почти атомным разрешением. В части кинетики и реологии микрофлюидные платформы, спектроскопия корреляции флуоресценции, одномолекулярное трекинг, восстановление после фотоблочения и оптические пинцеты мультискейл выявляют вязкость, межфазное натяжение и скорость обмена молекулами от слияния конденсатов до диффузии одиночных молекул. В аспекте молекулярной конформации и взаимодействий спектроскопические методы, такие как ЯМР, ИК-Фурье, круговой дихроизм и рамановская спектроскопия, позволяют разрешать изменения вторичной структуры белков и химическую сущность слабых межмолекулярных взаимодействий на уровне остатков. Кроме того, протеомика на основе масс-спектрометрии системно разбирает молекулярный состав конденсатов и сети взаимодействий, а флуоресцентная анизотропия может обнаруживать молекулярную ориентацию фибрилл внутри конденсатов. Наконец, электрофизические свойства конденсатов, такие как миллисекундные электрофоретические методы флеш-дизассоциации и измерения дзета-потенциала, предоставляют информацию о биомолекулярных взаимодействиях и физиологических функциях. Комплексное применение и перекрестная проверка этих методов обеспечивают надежную поддержку для всестороннего построения физико-химической картины LLPS от молекулярного до мезоскопического уровня.

жидкостно-жидкостной фазовый разрыв;биомолекулярные конденсаты;немембранные органеллы;аналитические методы;одномолекулярная флуоресценция;дзета-потенциал;грубозернистое моделирование