Метод сверхэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией для определения 13 одногидроксильных липидных медиаторов у нормальных крыс и моделей ревматоидного артрита

JIN Bo ,  

CHEN Yi-yang ,  

LIANG Ya-jing ,  

HU Xue-xin ,  

MA Chen ,  

摘要

В статье разработан метод сверхэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (UPLC-MS/MS) для определения содержания 13 видов одногидроксильных липидных медиаторов в тканях сердца, печени, селезенки, легких и почек нормальных крыс и крыс-моделей ревматоидного артрита, включая 7 видов гидроксиейкозатетраеновой кислоты (HETE) и 6 видов гидроксидокозагексаеновой кислоты (HDHA). Для предварительной обработки использовался метод жидкостно-жидкостной экстракции с ацетатом этиловым, содержащим 2,6-ди-третбутил-4-метилфенол (BHT) в качестве экстрагирующего раствора. Валидация методики показала, что пределы обнаружения (LOD) для 13 соединений составляют 0,1–1,0 нг/мл, пределы количественного определения (LOQ) – 0,5–2,0 нг/мл. Линейный диапазон для всех соединений, кроме 4-HDHA, варьируется от LOQ до 1000 нг/мл с коэффициентом корреляции (r) более 0,99. Восстановление при трех уровнях добавления варьировало от 82,5% до 118%, относительное стандартное отклонение (RSD) было меньше 7,5%. Внутридневная точность составляла менее 5,0%, междневная – менее 6,0%. Растворы образцов стабильны при комнатной температуре в течение 3 часов и при 4 °C в течение 72 часов. Метод характеризуется высокой чувствительностью, точностью и воспроизводимостью. Метод применен для определения содержания 13 одногидроксильных липидных медиаторов в тканях нормальных крыс и моделей ревматоидного артрита. Результаты показали значительные различия в распределении одногидроксильных липидов в различных органах нормальных крыс, а также тенденцию повышения большинства HETE и HDHA в тканях сердца, печени, легких и почек крыс с ревматоидным артритом, что указывает на метаболические изменения воспаления в органах при ревматоидном артрите.

关键词

Сверхэффективная жидкостная хроматография - тандемная масс-спектрометрия; одногидроксильные липидные медиаторы; ревматоидный артрит; гидроксиэйкозатетраеновая кислота; гидроксидокозагексаеновая кислота

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website