Обычные лаборатории при подготовке образцов микроорганизмов для сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) часто сталкиваются с проблемой отсутствия фиксажных реагентов и оборудования для сушки в критической точке. Для решения этих трудностей выбран перманганат калия (KMnO₄) в качестве фиксатора клеток, а также проведены улучшение и анализ методов подготовки, связанных с ключевыми этапами фиксации и сушки при подготовке СЭМ, с целью создания безопасного, экономичного и малообеспеченного оборудованием универсального метода подготовки образцов микроорганизмов для СЭМ. В качестве объектов исследования использовались кишечная палочка, Bacillus subtilis и дрожжи Saccharomyces cerevisiae. Образцы фиксировали однократно глутаровым альдегидом (GA-фиксация), двойной фиксацией глутаровым альдегидом и осмиевым тетроксидом (GA-OT) и двойной фиксацией глутаровым альдегидом и перманганатом калия (GA-PP). Образцы высушивали разными способами: лиофилизировали, сушили естественным способом, низкотемпературной и средне-низкотемпературной сушкой, а также сушкой в критической точке. После сушки клетки исследовали методом СЭМ для сравнения влияния обработок на морфологию и целостность клеток. Результаты показали, что фиксация GA-OT и GA-PP значительно лучше сохраняет морфологию клеток по сравнению с одиночной фиксацией GA; лиофилизация и сушка в критической точке лучше сохраняют исходную морфологию. Метод GA-PP с лиофилизацией эффективно сохраняет морфологическую структуру трех типов микроорганизмов: грамотрицательных бактерий, грамположительных бактерий и одноклеточных эукариотических грибов, соответствуя требованиям СЭМ и обладая преимуществами экономичности, универсальности и безопасности. Метод имеет высокий потенциал для широкого применения и предоставляет альтернативу для обычных лабораторий.

микроорганизмы; подготовка образцов СЭМ; двойная фиксация глутаровым альдегидом-KMnO₄; сушка