Бесмаркерный флуоресцентный аптамерный сенсор на основе конкурентного замещения тиазолового оранжевого T для быстрого обнаружения гепатотоксичного сенкирина

CHEN Pei-yao ,  

XIE Lin-hui ,  

XIE Yang ,  

GONG Ting ,  

LUO Ying-ping ,  

摘要

Быстрое обнаружение гепатотоксичного сенкирина (SEN) имеет важное значение для безопасности пищевых продуктов и общественного здравоохранения. В этом исследовании на основе ранее отобранных специфических нуклеиновых аптамеров для SEN был создан новый бесмаркерный флуоресцентный аптамерный сенсор. Ядро дизайна заключается в использовании специфического связывания тиазолового оранжевого T (ThT) с аптамером для генерации сильного флуоресцентного сигнала. В присутствии целевого SEN ThT заменяется конкурентным образом, что приводит к значительному снижению флуоресценции («режим выключения сигнала»). Сенсор обладает отличной способностью выявлять SEN с пределом обнаружения до 40 нмоль/л, образцы можно непосредственно наблюдать при облучении синим светом, при этом высокая специфичность сохраняется. В реальных образцах мёда метод сохраняет хорошую линейную зависимость (0~10 мкмоль/л, r² = 0.98), предел обнаружения составляет 414 нмоль/л, коэффициент восстановления при добавлении — 99,2%~103%, относительное стандартное отклонение менее 3,0%, что подтверждает точность и надежность применения в сложных матрицах. Исследование разработало новый метод обнаружения SEN с высокой чувствительностью, специфичностью и простотой использования, который служит перспективной технологической платформой для быстрого полевого скрининга пирролизидиновых биотоксинов в пищевых продуктах и китайских медицинских травах.

关键词

сенкирин; тиазоловый оранжевый T; флуоресцентный сенсор; нуклеиновые аптамеры

阅读全文