Разработан метод определения пяти эндогенных метаболитов в сыворотке крови крыс с иммуносупрессией, вызванной циклофосфамидом, с использованием сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (UPLC-MS/MS). Пробы сыворотки после осаждения белка анализировали с помощью колонки ACQUITY Poroshell 120 SB-C18 (2.1 мм×100 мм, 2.7 мкм) с градиентным элюированием метанолом и 5 ммоль/л ацетатом аммония для определения GSH, DL-Gln, GA и AA; а также колонки ACQUITY UPLC BEH Amide (2.1 мм×150 мм, 1.7 мкм) с градиентным элюированием ацорнитрилом и 5 ммоль/л форматом аммония для определения LPC(o-16∶0). В масс-спектрометре использовался источник электроспрей ионного возбуждения (ESI) в режиме положительных ионов с внутренним стандартом для количественного анализа. Результаты показали хорошую линейную зависимость (r > 0.995) в соответствующих диапазонах концентраций, предел обнаружения от 0.024 до 0.561 нг/мл, предел количественного определения от 0.145 до 0.592 нг/мл. Данный метод прост, быстр и высокочувствителен, подходит для определения эндогенных метаболитов в сыворотке крыс и служит экспериментальной основой для исследования механизма действия препаратов при иммуносупрессии.

сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией; сыворотка; эндогенные метаболиты; подавление иммунной функции