Разработан метод определения пяти эндогенных метаболитов в сыворотке крови крыс с иммунодефицитом, вызванным циклофосфамидом, с использованием сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (UPLC-MS/MS): глутатиона (GSH), DL-глутамина (DL-Gln), глутаминовой кислоты (GA), 1-O-гексадецил-SN-глицерофосфохолина (LPC(0-16∶0)) и арахидоновой кислоты (AA). После осаждения белков сывороточные образцы анализировались на хроматографической колонке ACQUITY Poroshell 120 SB-C₁₈ (2,1 мм × 100 мм, 2,7 мкм) с подвижной фазой из метанола и 5 ммоль/л ацетата аммония с градиентным вымыванием для определения GSH, DL-Gln, GA и AA; а также на колонке ACQUITY UPLC BEH Amide (2,1 мм × 150 мм, 1,7 мкм) с подвижной фазой из ацетонитрила и 5 ммоль/л формиата аммония для определения LPC(0-16∶0). Массовая спектрометрия проводилась с использованием электроспрейного ионизационного источника (ESI) в положительном и отрицательном ионных режимах с внутренним стандартом. Результаты показали хорошую линейность для всех пяти метаболитов в соответствующих концентрационных диапазонах (r > 0,995), пределы обнаружения составляют 0,043–0,178 нг/мл, пределы количественного определения – 0,145–0,592 нг/мл. Метод прост, быстрый и высокочувствительный, пригоден для определения эндогенных метаболитов в сыворотке крыс и обеспечивает экспериментальную основу для изучения механизмов действия препаратов для лечения иммунодефицита.

сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с тандемной масс-спектрометрией; сыворотка; эндогенные метаболиты; подавление иммунной функции