Путём обнаружения HN-DNA конъюгатов, образующихся у животных после воздействия азотистого иприта (HN), реализован анализ подтверждения происхождения экспозиции HN. Шестинедельные крысы Sprague-Dawley (SD) массой около 200 г интраперитонеально вводились растворы HN1, HN2 и HN3 для создания модели воздействия токсина, при этом были установлены группы с экспозицией HN (0,3 LD₅₀, 0,5 LD₅₀ и LD₅₀) и контрольная группа с растворителем. Использовалась высокоэффективная жидкостная хроматография-тандемная масс-спектрометрия (HPLC-MS/MS) в режиме мульти-реакционного мониторинга (MRM) для количественного анализа типов и содержания HN-DNA конъюгатов в моче крыс. Результаты показали хорошую линейность 12 стандартных образцов HN-DNA конъюгатов в диапазоне 0,02~500 нг/мл, предел обнаружения (LOD) составил 0,01~0,02 нг/мл, предел количественного определения (LOQ) – 0,02~0,05 нг/мл, относительные стандартные отклонения (RSD) внутри и между партиями были ниже 15%. Через 12 часов после экспозиции в моче крыс были обнаружены конъюгаты HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 и HN-Bis-GN7 с содержанием в порядке HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6. Концентрации этих четырёх конъюгатов положительно коррелируют с дозой воздействия и постепенно снижаются со временем. Применение HPLC-MS/MS для обнаружения DNA-конъюгатов в моче животных после воздействия HN обеспечивает бескровное раннее обнаружение, точное определение происхождения и оценку повреждений, что может служить основой для изучения процессов и механизмов восстановления повреждения DNA, вызванного HN.

Азотистый иприт;DNA-конъюгаты;биомаркеры;анализ происхождения;высокоэффективная жидкостная хроматография-тандемная масс-спектрометрия