Данное исследование основано на нанокубах серебра (Ag NCs) и транс-расщепляющей стратегии CRISPR/Cas13a для создания гидрофобного бумажного SERS-сенсора для обнаружения miR-943 в сыворотке пациентов с ишемическим инсультом (CI). Ag NCs собраны на гидрофобной бумаге для предварительного формирования SERS-субстрата. Односторонняя ДНК (ssDNA), модифицированная сигнальной молекулой Cy5, закреплена на гидрофобном бумажном SERS-субстрате с помощью Ag—S связи, создавая гидрофобный бумажный SERS-сенсор. В присутствии мишени miR-943 специфически активируется транс-расщепляющая способность CRISPR/Cas13a, вызывая неспецифическое расщепление ssDNA, что приводит к удалению Cy5 от поверхности гидрофобного бумажного SERS-субстрата и снижению интенсивности характерного пика SERS Cy5 при 1468 см^-1. Сенсор демонстрирует хорошую линейную зависимость в диапазоне 10 amol/L~10 pmol/L, коэффициент корреляции r²=0.986, предел обнаружения (LOD) составляет 1.55×10^-17 моль/л, а также обладает высокой специфичностью и воспроизводимостью. Результаты клинического анализа в целом соответствуют данным количественной ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени (qRT-PCR). Этот метод предоставляет надежное и перспективное решение для ранней неинвазивной диагностики ишемического инсульта.

поверхностно-усиленное рамановское рассеяние;ишемический инсульт;CRISPR/Cas13a;миРНК;сыворотка;нанокубы серебра (Ag NCs)