Гидрофобный бумажный SERS-сенсор на основе Ag NCs и CRISPR/Cas13a для обнаружения miR-943 в сыворотке пациентов с ишемическим инсультом

WANG Zi-xun ,  

CHEN Le-peng ,  

ZHANG Zhao-han ,  

ZHANG Xu-dong ,  

LI Tian-ran ,  

XU Qiong ,  

YANG Rui-rui ,  

QIAN Ya-yun ,  

摘要

Данное исследование основывается на серебряных нанокубах (Ag NCs) и стратегии транс-резки CRISPR/Cas13a для создания гидрофобного бумажного SERS-сенсора для обнаружения miR-943 в сыворотке пациентов с ишемическим инсультом (CI). Ag NCs были собраны на гидрофобной бумаге для первоначального создания подложки SERS, ssDNA, модифицированная сигнальной молекулой Cy5, была закреплена на гидрофобной бумажной SERS-подложке посредством Ag—S связывания, что позволило создать гидрофобный бумажный SERS-сенсор. В присутствии мишени miR-943 специфически активируется транс-резательная способность CRISPR/Cas13a, которая неспецифически разрезает ssDNA, отдаляя Cy5 от поверхности гидрофобной бумажной SERS-подложки, что приводит к снижению интенсивности характерного пика Cy5 при 1468 см^-1. Сенсор демонстрирует хорошую линейность в диапазоне от 10 амоль/л до 10 пмоль/л с коэффициентом корреляции r^2=0,986, предел обнаружения (LOD) достигает 1.55×10^-17 мол/л, обладает высокой специфичностью и воспроизводимостью. Результаты клинических проб в основном совпадают с результатами количественной ПЦР в реальном времени (qRT-PCR). Этот метод предоставляет надежное и многообещающее решение для ранней неинвазивной диагностики ишемического инсульта.

关键词

поверхностно-усиленное рамановское рассеяние;ишемический инсульт;CRISPR/Cas13a;миРНК;сыворотка;серебряные нанокубы (Ag NCs)

阅读全文