Приготовление моноклональных антител к тяжелому металлу хрому и разработка метода иммунного анализа

LIN Ci ,  

SHU Guang-ping ,  

WANG Qi ,  

YUE Xu-hui ,  

XU Nai-feng ,  

LINGHU Ke-yong ,  

WANG Yuan-feng ,  

摘要

Были приготовлены моноклональные антитела к тяжелому металлу хрому и разработан метод быстрого качественного анализа на основе иммунохроматографии с цветными латексными микросферами. Метод изотиоцианатного реагента применялся для конъюгации с белками-носителями, образуя целый антиген (иммуноген и покрытую форму). Специфичные моноклональные антитела (4G9), распознающие тяжелый металл хром, были получены иммунизацией мышей. Результаты показали, что полувызывающая концентрация (IC50) моноклонального антитела 4G9 составляла 21,9 нг/мл, при этом коэффициенты перекрестной реакции с тяжелыми металлами кадмием, свинцом, ртутью, мышьяком, медью, железом и никелем были менее 0,3%. На основе этого был разработан метод иммунохроматографии с цветными латексными микросферами для определения тяжелого металла хрома, оптимизированы количества антител, концентрации линий T на тест-полосках, количество зонда и pH системы тест-полосок. При оптимальных рабочих условиях предел обнаружения (LOD) для полосок составил 0,95 нг/мл, линейный диапазон — от 0,78 до 25 нг/мл; в реальных образцах спаржи LOD составил 5,15 нг/мл, с возвратом добавки от 75,3% до 119%, относительное стандартное отклонение не превышало 10%. Метод применим для быстрого обнаружения остаточного хрома в реальных образцах.

关键词

тяжелый металл хром;моноклональные антитела;техника иммунохроматографии;тест-полоски

阅读全文