В статье систематически проанализировано хроматографическое поведение растворенных веществ в колонках с наполнением смешанной неподвижной фазой. Теоретически получены выражения, отражающие связь между коэффициентом удерживания растворенного вещества и составом неподвижной фазы в колонках с различными соотношениями наполнителя. Далее были смешаны обратная фаза и сильно катионитный обменный неподвижный фаз, изготовленные из носителей одинакового размера и формы, и заполнено 6 колонок с разным соотношением смешивания. В качестве моделей использовались бензольные соединения, аминокислоты и алкалоиды, экспериментальные данные показали, что тенденция изменения коэффициента удерживания соответствует теоретическим выражениям. На примере чесночника исследовано разделение на смешанной колонке, результаты показали, что неподвижные фазы с разным соотношением обеспечивают существенно различающееся удерживание соединений с разной структурой, что согласуется с теоретическими прогнозами. Смешанная неподвижная фаза полноценно использует особенности различных режимов разделения, и разделительные свойства новых колонок можно прогнозировать по хроматографическому удерживанию их исходных фаз, что открывает новые возможности для проектирования колонок и режимов разделения и имеет широкие перспективы применения.